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氧化电位水对微生物杀灭效果的实验研究

来源:中华现代临床医学杂志 作者:张燕 包扬 2005-9-22

摘要: 【摘要】 目的 了解氧化电位水对微生物杀灭效果,以指导实际应用。 方法 对微生物杀灭效果实验用悬液法,对金属腐蚀性用称量法。 结果 100%杀灭大肠杆菌(8099)、金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、白色念珠菌(ATCC10231)、枯草杆菌黑色变种芽孢(ATCC9372)的剂量分别是45mg/L作用10min、64mg/L作用15min、100mg/L作用25m......


  【摘要】 目的  了解氧化电位水对微生物杀灭效果,以指导实际应用。 方法  对微生物杀灭效果实验用悬液法,对金属腐蚀性用称量法。 结果  100%杀灭大肠杆菌(8099)、金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、白色念珠菌(ATCC10231)、枯草杆菌黑色变种芽孢(ATCC9372)的剂量分别是45mg/L作用10min、64mg/L作用15min、100mg/L作用25min、250mg/L作用20min。完全破坏HBsAg的抗原性240mg/L作用2min,杀菌效果受温度和有机物的影响。 结论  氧化电位水消毒剂对细菌杀灭作用强,对金属有一定腐蚀性,对HbsAg破坏作用迅速。
    
  关键词  氧化电位水 金黄色葡萄球菌 白色念珠菌 枯草杆 菌黑色变种 腐蚀性
       

      
  我们研制的氧化电位水消毒剂是利用物理化学的基本原理,在高氧化还原电位OPR(800~1100mV以上)、弱酸性(pH值5.5)环境及化学因子(次氯酸、过氧化氢、溶解和OH基)的共同作用下,使细菌的代谢受到破坏、细胞膜通透性增强,细胞膜破裂、细胞内物质外漏而达到杀菌的目的。产品为固体粉剂,A、B两剂合一(二元包装),性质稳定,运输使用方便,溶解迅速,其配置的水溶液无色无味透明。现将其性能及杀菌效果的试验结果报告如下。

  1 资料与方法
    
  1.1 一般资料 大肠杆菌(8099)、金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、白色念珠菌(ATCC10231)、枯草杆菌黑色变种芽孢(ATCC9372)均购自军事医学科学院卫生检疫中心,纯化HBsAg购自北京肝炎试剂中心,浓度1mg/ml,实验用金属片购自中国预防医学科学院消毒检测中心,氧化电位水消毒剂为厦门澎龙科技发展有限公司生产。

  1.2 方法

    1.2.1 悬液定量杀菌试验 悬液法 [1] 。取菌悬液0.5ml加入到盛有消毒液4.5ml的试管中,混匀,作用至预定时间。取样液或稀释液0.5ml接种平皿,倾注普通营养琼脂并混匀,置于37℃温箱中,繁殖体培养48h,芽胞培养72h,计数菌落,计算杀灭率。

    1.2.2 乙型肝炎表面抗原破坏试验 悬液法。取消毒剂2.0ml加到试管中,加HBsAg(10μg/ml)0.5ml(为试验灵敏度的10000倍),混匀,作用至规定时间,取0.5ml加等量中和剂,中和10min,取中和后样液0.05ml用酶联免疫吸附法(ELISA)检测,同时作阴性对照(中和产物0.8ml+PBS0.2ml)和阳性对照(中和产物0.8ml+HBsAg悬液0.1ml+PBS0.1ml)。以S/N≤2.1为抗原性破坏。(预试验确定杀菌试验用0.3%硫代硫酸钠作中和剂、HBsAg破坏试验用含0.3%硫代硫酸钠+0.5%吐温80+0.04%氢氧化钠+20%小牛血清的PBS作中和剂)。
   
  1.2.3 金属腐蚀性实验 称量法。将不锈钢、铜、铝、碳钢(直径为1cm,表面积为9.7968cm 2 )洗净烘干。按每片金属片500ml的量加消毒液浸泡(有效氯150mg/L),一种金属片一个容器,每24h换一次消毒液,浸泡至72h,取出金属片用蒸馏水反复冲洗,用滤纸吸干水,50℃烘干1h,进行消毒液浸泡后称重。按公式R=8.76×10 7 (M-Mt)/S·t·D计算腐蚀速率。
   
  S:金属片表面积(cm 2 );t:浸泡时间(h);D:金属材料密度(kg/m 3 );M、Mt:分别为试验前后金属片重量(g);R:腐蚀速率(mm/年)。
   
  1.2.4 杀菌效果影响因素研究 载体法 [1] 。测定温度和有机物(以小牛血清为代表)对杀菌效果的影响。

  2 结果
    
  2.1 定量杀菌试验 试验表明,氧化电位水消毒剂对试验菌有理想杀菌效果,100%杀灭大肠杆菌(8099)、金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、白色念珠菌(ATCC10231)、枯草杆菌黑色变种芽胞(ATCC9372)的剂量分别为:45mg/L作用10min、64mg/L作用15min、100mg/L作用25min、250mg/L作用20min,结果见表1~4。

  表1 氧化电位水消毒剂对大肠杆菌杀灭率 (略)
    
  表2 氧化电位水消毒剂对金黄色葡萄球菌的杀灭率 (略)

  表3 氧化电位水消毒剂对白色念珠菌的杀灭率 (略)
    
  表4 氧化电位水消毒剂对枯草杆菌黑色变种芽胞的杀灭率 (略)
    
  2.2 对HBsAg抗原性破坏试验 氧化电位水消毒剂对HBsAg的抗原性有较好的破坏效果,结果表明240mg/L的消毒剂作用2min,能完全破坏HBsAg的抗原性。见表5。
    
  表5 对HBsAg抗原性破坏试验结果略
    
  2.3 腐蚀性试验 氧化电位水消毒剂对不锈钢基本无腐蚀,对碳钢、铜、铝为中度腐蚀,结果见表6。 

  表6 氧化电位水消毒剂对金属腐蚀性试验结果 略
    
  2.4 温度对杀菌作用的影响 250mg/L氧化电位水消毒剂在0℃、10℃、20℃、30℃、40℃、50℃条件下对不锈钢载体上的枯草杆菌黑色变种芽胞全部杀灭所需时间分别为48min、43min、29min、21min、33min、49min,效果以20℃、30℃左右为好,温度<10℃或>50℃杀菌时间明显延长,见图1。
 
  图1 温度对杀菌效果的影响 略
    
  2.5 有机物对杀菌作用的影响 氧化电位水消毒剂对大肠杆菌的杀灭作用受有机物影响较小,在有机物含量分别为0、25%、50%时,40mg/L消毒剂作用5min对大肠杆菌的杀灭率分别为99.98%、99.97%、99.97%;氧化电位水消毒剂对枯草杆菌黑色变种芽胞的杀灭作用受有机物影响较大,在有机物含量分别为0、25%、50%时,280mg/L消毒剂作用10min杀灭率分别为79.99%、52.87%、36.13%。
    
  3 讨论
    
  氧化电位水是近年在日本首先出现的一种新型消毒用水,已得到医学界的广泛认可 [1] 。这种水表面上看与自来水并无区别,但其具有低pH值、氧化还原电位、一定的有效氯,对细菌、病毒有强而迅速的杀灭能力,对皮肤无任何不良刺激 [2] 。在完成杀菌以后,可迅速与阳光、空气及普通有机物结合,还原成普通水,没有环境污染。
   
  氧化电位水消毒剂,在临床上的应用表明 [3] ,可用于各类内镜、牙钻等易引起交叉感染的器械的消毒方面,效果与戊二醛相当,但却具有清洗时间短、价格低廉、使用方便等优点,是现有化学消毒剂的理想替代品。对痤疮、皮炎、湿疹、体癣、顽固性溃疡等多种皮肤病疗效甚佳。对烧伤、创伤部位的清洗,可加速伤口愈合 [4,5] 。用于治疗体内的各类溃疡病也具有奇效。氧化电位水在其他方面的应用及作用机制,目前仍在探索研究之中。
    
  参考文献
    
  1 陈贵秋,李爱斌,朱应凯,等.两种方法检测高氧化还原电位酸性水对微生物杀灭效果的比较.中国消毒学杂志,2001,18(1):1.

    2 栾湘宁,魏华,张红英,等.强氧化离子水在医院的应用与管理.中华医院感染学杂志,1998,8(4):232.

    3 李新武,孙守宏,李涛,等.酸化电位水对微生物的杀灭效果及其作用机理的初步研究.中华流行病学杂志,1996,17(2):95.

  4 何利平,郭燕艺,林立旺.高氧化还原电位酸性水杀灭微生物与消毒胃镜的效果.中国消毒学杂志,2001,18(2):115.

  5 王国卿,刘丽华,冯晓玲,等.强氧化离子水治疗严重创面感染的作用.中华医院感染学杂志,1999,9(3):156.      

  作者单位:1 430035湖北省武汉市军事经济学院门诊部
  
       2 352103福建宁德海军三都医院

  (收稿日期:2004-07-19) (编辑商志伟)


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