ISNT的流式细胞仪分析

　　1．离心收集细胞，PBS洗1～2次

　　2．1％多聚甲醛低温下固定15min。

　　3．3ml PBS洗1次，70％乙醇固定，冰箱内放置1～3天。

　　4．PBS轻洗1次。

　　5．2×105细胞与12.5μl的缺口平移缓冲液在15℃共孵育6h，每过15min振动1次。

　　6．PBS轻洗1次。

　　7．细胞在黑暗中37℃与100μl的染色缓冲液孵育30min。

　　8．含0.1％ Triton-X 100的PBS轻洗1次。

　　9．1ml PBS（含5mg/ml PI, 0.1% RNase A）重悬。

　　10．流式细胞仪分析红色（PI）对绿色荧光（FITC）的地形图。