主题:胶体金

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胶体金法检测乙型肝炎表面抗原中的迟缓反应

  用胶体金法检测乙肝表面抗原(HBsAg),因其快速、简便,结果直观而得到广泛应用。但我们在临床工作中发现,在检测时有一些标本有迟缓反应现象,即阳性带出现很慢,为了解这些标本的结果,我们用酶免法进行了两对半的对比检测,现将结果报告如下。

  1 材料与方法
   
  1.1 标本来源 32例标本均为我们在日常工作中胶体金检测HBsAg时有迟缓反应的标本。

  1.2 试剂和方法 胶体金标本为北京蓝十字公司提供,乙肝两对半试剂为上海荣盛产品。方法按说明书操作。
   
  2 结果

  32例标本两对半检测结果如下:所有标本酶免法结果HBsAg均为阳性。其中HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性3例,占9.38%,HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性18例,占56.25%,HBˉsAg、HBcAb阳性5例,占15.63%,单纯HBsAg阳性6例,占18.75%。
   
  3 讨论

  胶体金检测HBsAg时,按说明要求应在30min内报告。而我们的32例标本在这个时间内出现阳性带很浅或隐约出现的现象,对结果判断有很大影响。用酶免法检测时,32例标本中均未出现HBsAg阴性的结果,认为它们HBsAg均为阳性。所以对于胶体金检测中的这种迟缓反应现象应引起大家的重视。如果在检测时出现阳性带很浅或隐约出现时,应把时间延长。不一定在30min内出阴性报告。一般均应报告为阳性。

  作者单位:637000四川南充解放军第51医院检验科
                 四川川北医学院附院

日期:2005年6月2日 - 来自[检验与临床]栏目
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乙型肝炎表面抗原胶体金试剂的研制

  乙型肝炎表面抗原(HBsAg)胶体金试剂系用2株小鼠抗HBsAg不同表位的单克隆抗体,一株用胶体金标记,并固定在玻璃纤维素膜上;另一株包被硝基纤维素膜作为固相。然后,将该两种膜分别粘贴在双面胶白色塑料垫板上,制成试纸条。其原理是用双抗体夹心法检测血清中HBsAg。血清中HBsAg先与胶体金标记的抗-HBs单克隆抗体起反应,然后再与包被于硝基纤维素膜上的抗-HBs单克隆抗体作用,并在该处显示紫红色条带。其具体检测方法如下:首先将可拆微量反应板固定在塑料框架上,然后每孔加入待测血清200μl,最后将HBsAg胶体金试剂纸条插入血清内,置室温下10?min后在自然光下观察结果。如试纸条上出现2条紫红色条带,则为HBsAg阳性;如试纸条上只出现1条紫红色阳性对照条带,而无HBsAg阳性条带,则判断为阴性;如试纸条上无任何条带出现,则为试剂失效。

  本试剂盒经中国药品生物制品检定所检定,其灵敏度为1ng/ml,特异度为100%(20/20),精密度为100%(10/10),符合国家对HBsAg试剂盒的要求。该试剂盒经中国人民解放军302医院、北京市卫生防疫站和北京市红十字血液中心等单位临床考核,并分别与华美生物工程公司、科华生物技术公司和国外阿克苏HBsAg ELISA比较,其灵敏度分别为98.4%(492/500)、100%(118/118)和94.0%(284/302);特异度分别为97.5%(39/40)、99.1%(1866/1882)和98.2%(2455/2499);总符合率分别为98.3%(531/540)、99.2%(1984/2000)和97.4%(2739/2801)。在4℃下的稳定性至少为8个月。本试剂盒于1999年通过国家药品监督管理局的新药评审,获二类新药证书,保护期为8年。

  本试剂盒快速、简便,一般在10?min内即可出结果,不需要特殊的仪器和设备,可用于献血员筛查、健康人群体检、HBV感染的流行病学调查和临床诊断,特别适合于紧急情况下的HBsAg检测及基层医疗卫生单位应用。

日期:2004年9月24日 - 来自[免疫学]栏目
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