主题:皂甙

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HPLC法测定复方丹参片中人参皂甙Rb1的含量

【摘要】    目的 测定复方丹参片中人参皂甙Rb1的含量。 方法 HPLC法,流动相:乙腈-水(30:70),检测波长204nm。结果人参皂甙Rb1的线性范围:0.075mg~1.20mg,r=0.9925,回收率为99.3%,RSD为3.1%。结论 本法灵敏、准确,可作为该产品的质量控制指标。

【关键词】  HPLC法;复方丹参片;人参皂甙Rb1

  复方丹参片由丹参、三七、冰片制成,具有活血化瘀,理气止痛的功效。临床用于气滞血瘀所致的胸痹、症见胸闷、心前区刺痛;冠心病、心绞痛见上述证候者。
        
  三七是处方中的主药,人参皂甙Rb1是三七的有效成分之一,本文采用HPLC法测定人参皂甙Rb1的含量,方法简便、可靠。

  1 材料与方法

  1.1 仪器与试剂 

  SP8800高效液相色谱仪,SPECTRA200检测器,SP4270积分仪。人参皂甙Rb1(中国药品生物制品检定所),复方丹参片(山西亚宝药业集团股份有限公司生产,批号:061011、061107、061208)。乙腈为色谱纯,其他均为分析纯。

  1.2 实验条件

  1.2.1 色谱条件 

  C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-水(30:70),检测波长204nm;流速:1.0ml/min;理论板数以人参皂甙Rb1峰计算,应不少于1 000。

  1.2.2 检测波长的选择 

  取人参皂甙Rb1对照品适量,用岛津UV-2201紫外可见分光光度计在190~350nm波长下扫描。结果人参皂甙Rb1在204nm波长处有最大吸收,故选择204nm作为测定波长。

  1.3 供试液的制备 

  (1)对照品溶液:精密称取人参皂甙Rb1对照本品适量,加甲醇制成每1ml分别含0.075、0.15、0.30、0.60、1.20mg的溶液作为对照品溶液。(2)样品溶液:取复方丹参片10片磨成粉状,溶于10ml蒸馏水中,滤过,滤液用乙醚提取2次,每次15ml,弃去醚层。用水饱和正丁醇提取4次,每次10ml,合并醇层用正丁醇饱和水洗涤2次。加树脂拌匀,挥干正丁醇,置D101大孔树脂上面[1],用水洗脱至糖的反应为阴性,用水饱和正丁醇100ml洗脱收集醇液,挥干正丁醇,用甲醇转移至25ml容量瓶中并稀释至刻度,摇匀,过滤,作为供试品溶液。

  1.4 线性关系考虑 

  将上述各浓度的对照品溶液分别进样10μl,记录峰面积,以峰面积为纵坐标,浓度为横坐标进行线性回归,计算得回归方程:Y=2 926.8x+3 041.1,r=0.9925。结果表明:人参皂甙Rb1进样量在0.075~1.20mg范围内峰面积积分值与浓度呈良好的线性关系。

  2 结果与讨论

  2.1 精密度试验 

  精密吸取上述对照品溶液10μl,重复进样5次,测得人参皂甙Rb1峰面积的RSD为0.92%。

  2.2 稳定性试验
 
  精密吸取同一批供试液10μl,每隔1h进样一次,共进样6次。结果表明:供试品溶液在5h内基本稳定,RSD为1.13%(n=6)。

  2.3 重现性试验

  取同一批样品5份,依法平行测定5次,结果RSD为1.22%(n=5)。

  2.4 回收率试验 

  测定已知含量的样品(批号060908,含量2.04mg/片),按样品溶液制备方法制备,加入对照品适量,依法测定,计算回收率。平均回收率为99.3%,RSD为3.1%。

  2.5 分别精密吸取3批样品各3份按样品溶液制备方法制备。分别精密吸取对照品溶液及样品溶液10μl注入高效液相色谱仪中测定,即得结果见表1。表1  样品溶液和对照溶液在高效液相色谱仪测定结果(略)

  2.6 要注意样品提取,按药典[2]方法药材的HPLC色谱已经很稳定,但样品的色谱较差。故改进提取方法,过大孔树脂柱,此法测试结果稳定,效果较好。本法灵敏、准确,可作为该产品的质量控制指标。

【参考文献】
    [1]马振山,大孔吸附树脂在药学领域中的研究应用[J].中成药,1997,19(12):40.

  [2]国家药典委员会 . 中国药典(2005年版)一部[S]. 北京:化学工业出版社,2005:10:11.


作者单位:广东医学院附属医院 ,广东 湛江 524001.

日期:2010年1月13日 - 来自[2008年第8卷第1期]栏目

β-七叶皂甙钠致静脉炎的防护与护理

【关键词】  静脉炎


    七叶皂甙钠是从七叶树科植物天师栗子的干燥成熟种子中提取的一种含酯键三萜皂甙,能促使机体提高ACTH和可的松血浆浓度,能促进血管壁增加PGF2α的分泌,能消除机体内自由基,从而起到抗炎,抗渗出,提高静脉张力,加快静脉血流,促进淋巴回流,改善血液循环和微循环,并有保护血管壁的作用。用于急慢性组织损伤所致的水肿及各类血管疾病所致的局部血液循环障碍。在临床应用过程中,发现有部分患者在静脉滴注3~5天后在血管局部出现不同程度的静脉炎及其周围组织损伤,出现酸、麻、胀、痛等刺激症状,并以输液静脉针眼为中心向上、左右扩散,局部皮肤发红,有条索感,灼热并有压痛,静脉变硬、弹性消失,肢体活动时疼痛加重,时而伴有水肿,不能继续输液。2006年12月~2007年5月,我科对接受静脉滴注β-七叶皂甙钠的36例患者采取综合性的防护措施,对减少静脉炎的发生取得了满意的效果,现总结如下。

    1  临床资料

    1.1  一般资料  本组男22例,女14例;年龄36~79岁,平均57.5岁。其中脑梗死20例,脑出血16例,平均住院15天,患者均无意识障碍和穿刺部位感觉障碍。

    1.2  用药方法  β-七叶皂甙钠粉剂5mg/瓶,用15~20mg溶于5%葡萄糖液或生理盐水250ml中静脉滴注,每天1次,7~10天为1个疗程。

    1.3  血管反应情况  用药10~15min出现穿刺处发红,静脉呈现红线5例,用药3天静脉有局部疼痛、肿胀、红肿12例,用药7天以上静脉局部疼痛、变硬、有条索感19例。

    2  防护对策

    2.1  心理护理  用药前向患者耐心讲解药物的药理作用及不良反应,取得患者配合。

    2.2  高浓度快速滴注  此药物对局部静脉损伤较为严重,因此在输液过程中应严格执行无菌操作,合理选用粗、直、弹性好的大血管进行穿刺,穿刺应一次成功,针头要完全置于血管内,避免刺激血管壁;固定要牢固,防止针头滑出血管外;局部热敷等。上述措施对减轻静脉刺激和损伤有显著疗效,其中热敷后不仅可以提高静脉穿刺成功率,而且能使血管扩张,增加通透性,防止大分子物质沉积于血管壁和加快新陈代谢,有利于减轻静脉刺激症状和血管壁损伤。

    2.3  输液过程中防止液体外渗  及时观察穿刺部位,做到早发现、早治疗。若发现外渗,应立即停止输液,报告医生,更换穿刺部位,立即给予热敷,或用50%硫酸镁热敷。

    2.4  避免反复穿刺同一部位  与甘露醇合用时尤应注意。对老年患者及有血管性疾病者应避免使用下肢静脉,尽量选择较粗而直的静脉并将注射肢体适当抬高以利于回流。同一静脉应避免反复多次使用。输液处如有肿胀,即使回血良好,也应另外选择静脉,重新穿刺后再输该药。

    2.5  注意观察有无不良反应  首次静脉滴注时应先15~20滴/min,如发现皮肤瘙痒及出现红色丘疹等变态反应,应立即处理;若无不良反应,可逐渐增至60滴/min。

    2.6  2%利多卡因湿敷  用浸过2%利多卡因溶液的湿纱布(以不滴液为宜)敷在输液肢体上距进针点1cm处,在输液过程中保持纱布湿润,输完该药后将纱布取下,可有效防止静脉炎的发生。

    3  体会

    通过临床应用β-七叶皂甙钠,深切体会到:加强护士的素质教育、加强责任心、强化质量安全意识、不断学习和补充药理学知识,提高护士安全用药水平是确保安全用药和治疗效果的有力措施。在用药过程中,护士应本着认真、负责的态度,密切观察药物的疗效和不良反应,主动询问、认真检查有关症状和体征,尽早发现异常情况,及时报告医生并做好记录。一个优秀的护士不仅要准确的执行医嘱,更重要的是能够根据患者的具体情况科学地执行医嘱,这样才能避免严重药物不良反应发生,减少护理差错,从而最大限度地减轻患者的痛苦。

 


作者单位:362000 福建泉州,解放军180医院内二科

日期:2008年6月30日 - 来自[2007年第7卷第12期]栏目

β-七叶皂甙钠治疗丹毒疗效观察

【摘要】    目的 观察β-七叶皂甙钠治疗丹毒的疗效。方法 回顾性分析2003年3月~2007年2月应用β-七叶皂甙钠治疗下肢丹毒50例的治疗效果。结果 治疗组总有效率明显高于对照组,差异有显著性。结论 β-七叶皂甙钠治疗丹毒有较好的疗效,尽早应用能有效缩短治愈时间。

【关键词】  丹毒;β-七叶皂甙钠

  Therapeutic evaluation of sodium aescinate for erysipelas

    WU Li,YU De-jin,YU Qing-song.Department of Surgery,Jiangsu Second Traditional Chinese Medicine Hospital, Nanjing, Jiangsu 210017,China

    【Abstract】 Objective To study the clinical effect of sodium aescinate for injection for patients with erysipelas. Methods 50 patients with erysipelas by treatmented with aescinate for injection were analyzed retrospectively. Results There was significant difference in the efficient rate between treatment group and control group. Conclusion There were the better clinical effect of sodium aescinate for injection for patients with erysipelas .Used early can reduce the time of treament.

    【Key words】 erysipelas; sodium aescinate

    丹毒是由溶血性链球菌从损伤破裂的皮肤或黏膜侵入,或从其他感染病灶,如疖、足癣等处侵入,经组织的淋巴间隙进入淋巴管内,引起的皮肤及其网状淋巴管的急性炎症。为观察β-七叶皂甙钠治疗丹毒的疗效,自2003年3月~2007年2月我们用β-七叶皂甙钠治疗丹毒,取得了满意疗效,现报告如下。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 我院外科2003年3月~2007年2月就诊的丹毒患者,青霉素试验阴性者共50例,其中,患病部位为小腿处者12例,踝部者13例,足背部者25例,伴腹股沟淋巴结肿大者19例,伴发热者33例,选此50例为实验对象,男21例,女29例,年龄33~78岁,平均年龄54岁。将50例患者随机分为两组,其中治疗组为26例,对照组为24例,治疗组中男11例,女15例,对照组中男10例,女14例,两组性别、年龄、病情等方面无统计学差异,具有可比性。

    1.2 治疗方法 对照组予以青霉素800万U/d静脉滴注,青敷膏局敷,休息,抬高患肢。治疗组在对照组的基础上加用β-七叶皂甙钠10mg加入0.9%氯化钠注射液250ml中静脉滴注,每日1次。

    1.3 疗效评定标准 治愈:症状、体征完全消失;有效:症状、体征明显缓解;无效:症状、体征无明显变化。

    1.4 统计学方法 根据资料采用χ2检验,确定差异的显著性,P<0.05有统计学意义。

    2 结果

    两组病人治疗后疗效评定结果见表1。表1 两组疗效比较根据表1所见,总有效率:治疗组96.15%,对照组87.5%,治疗组总有效率明显高于对照组,P<0.05,差异有显著性。

    3 讨论

    丹毒是皮肤及其网状淋巴管的急性炎症,好发于下肢和面部,起病急,多由β-溶血性链球菌致病,致病菌进入人体后,人体组织发生炎症反应,释放多种促炎因子,细菌的毒素、细胞和血浆蛋白释放出来的组织胺、激肽等血管活性物质,使毛细血管和微静脉内血流缓慢、压力增加,并发生扩张,血管通透性增加,组织水肿,血管内皮细胞损伤,微循环障碍。出现红、肿、热、痛等临床感染的表现。青霉素对β-溶血性链球菌较为有效。丹毒中医又称“流火”,为热毒之气,爆发于皮肤间,不得外泻,蓄热而致,目前临床上多采用西药抗菌,中药凉血化瘀,清热解毒,中西医结合治疗一般均能治愈。

    β-七叶皂甙钠是一种从七叶树科植物天师粟的干燥成熟种子中提取的一种含酯键的三萜皂苷。是新一代抗渗出消肿药物。临床主要用于治疗脑水肿、创伤或手术所致肿胀及静脉回流障碍性疾病,有少量用于治疗胰腺炎报道,而用于治疗丹毒者尚未见相关文献报道。研究表明:β-七叶皂甙钠能使机体提高促肾上腺皮质激素和可的松的血浆浓度,抑制组织胺所致毛细血管通透性增加。增加PGF分泌,阻滞细胞的腺苷三磷酸酯酶的作用,并延缓Na+的交换[1],恢复毛细血管的通透性,从而起到抗炎、抗渗出的作用。另外,β-七叶皂甙钠的结构式中含有七个羟基,能捕获氧自由基,抑制脂质过氧化反应[2],还具有稳定血管内皮细胞,消除细胞内水肿,扩张动脉,提高静脉张力,加快静脉血流,改善微循环的血液瘀滞状态,加快微循环,清除炎性介质,促进淋巴回流的作用,从而达到消除水肿,促进炎症消退的目的。

    综上所述,及早应用β-七叶皂甙钠治疗丹毒能在较短时间内控制炎症发展,促进水肿消退,有效缩短治愈时间。值得临床广泛使用。

【参考文献】
     1 秦得营,李向锋,王克.赛莱乐联合七叶皂甙钠治疗外周血管疾病23例分析.河南实用神经疾病杂志,2004,7(4):89.

2 林剑梅,曹向光,左平英. β-七叶皂甙钠的药理作用及国内应用概况.中国药师,2003,6(7):445-446.


作者单位:210017 江苏南京,江苏省第二中医院外科

日期:2008年5月30日 - 来自[2007年第3卷第1期]栏目

茅莓总皂甙对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑水肿及血-脑脊液屏障变化的影响

2008年04月22日 中国中药杂志 32(20):2166 医学空间(MEDcyber.com)4月22日消息--中国重庆的研究人员近期研究了茅莓总皂甙(TSRP)对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑水肿及血脑屏障通透性的影响。采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,在大鼠脑缺血2h再灌注6,24,48,72h分别测定脑含水量和伊文思蓝含量的变化及茅莓总皂甙各剂量组的影响。结果显示,与模型组比较茅莓总皂甙各剂量组均能不同程度降低脑含水量和伊文思蓝含量。茅莓总皂甙各剂量组显著降低缺血2h再灌注6,24,48,72h脑水肿和其对血脑屏障通透性,这可能是其减轻I/R时脑水肿的机制之一。
日期:2008年4月22日 - 来自[药理学]栏目

高效液相色谱-电喷雾质谱联用法分析罗汉果皂甙

    摘要:【目的】建立罗汉果皂甙的HPLC/ESI/MS2 定性分析方法。【方法】采用高效液相色谱-电喷雾质谱联用法对罗汉果皂甙提取物进行分离分析。【结果】根据主要色谱峰的质谱特征,初步鉴定出罗汉果皂甙提取物中主要的皂甙成分为11-氧-罗汉果皂甙V(11-oxo-mogroside-V)、罗汉果皂甙V(mogroside-V)、罗汉果皂甙IV(mogroside-IV)、罗汉果皂甙VI(mogroside-VI)和赛门甙I(siamenoside-I)。【结论】对于罗汉果皂甙的分离及定性分析,高效液相色谱-电喷雾质谱(HPLC/ESI/MS2)联用分析法是一种方便快捷有效的方法。
    关键词:罗汉果(Siratia grosvenori);罗汉果皂甙;高效液相色谱-电喷雾质谱联用法
    罗汉果是广西特产中药,研究表明,强甜味的非糖物质三萜类成分罗汉果皂甙(mogroside)是其主要成分[1,2]。罗汉果皂甙属葫芦素烷型化合物,种类较多,结构相似,迄今已从罗汉果果实中分离并鉴定出11 种葫芦烷三萜甙类(cucurbitane glycoside)化合物[3~5]。
    罗汉果皂甙的药理作用已有研究[6~9],因此建立快速、准确的罗汉果皂甙分析鉴定新方法,对其生物活性的研究具有重要理论意义。若采用薄层色谱法或高压色谱法等传统方法分析检测罗汉果皂甙提取物中的罗汉果皂甙,需用标准样品进行定性分析,但罗汉果皂甙的标准样品目前尚无供应厂商,自行分离或合成标准样品则费时费力,因此给罗汉果皂甙的定性分析带来诸多不便。
    电喷雾(ESI)是一种软电离技术,能够有效地收集离子和提供大量的碎片信息,易于与高效液相色谱联用(HPLC/MS),这种联用技术具有分析速度快、分辨率高和灵敏度高的特点,并且具有对分析的样品进行快速定性的能力,已广泛应用于药物的检测和定性及其它领域。有关皂甙类化学成分的液质联用分析已有报道[10],但对罗汉果中主要皂甙成分的液相分析及其电喷雾质谱研究尚未见报道。本文利用液相色谱-电喷雾-质谱/质谱联用的方法分离罗汉果皂甙提取物,并对其中的主要皂甙成分进行了定性分析,方法简便快速。

    罗汉果皂甙提取物的制备
    取500.00 g 罗汉果鲜果捣碎后用8 倍的水于80℃下提取3 次,每次1 h,过滤,收集滤液,于60℃下真空浓缩后调pH 9.0,然后上大孔树脂D101 柱,依次用蒸馏水、30%乙醇溶液、60%乙醇溶液进行洗脱,收集60%乙醇洗脱液后,经真空浓缩、冷冻干燥即得2.50 g 罗汉果皂甙提取物,经分光光度法分析[11,12],该提取物的总皂甙
含量≥98%。

    HPLC/ESI/MS 分析
    样品溶液的配制:准确称取罗汉果皂甙提取物0.0100 g,用23%乙腈溶解并定容至10 ml。
    色谱条件:柱型:Hypersil ODS C18 柱(250 mm×4.6mm ID,5 μm);流动相:乙腈∶水∶NH4Ac=23∶77∶0.05;柱温:30℃;流速:0.3 ml·min-1;进样量:1.0 μl。
    质谱条件:ESI 离子源电离,喷射电压:5 000 V;毛细管温度:250℃;喷射压力:25.0 PSI;干燥气流速:8.0 L·min-1;干燥气温度:250℃;扫描质量范围:100~1700 amu。负离子模式。

    ESI/MS2 分析
    ESI 离子源电离,喷射电压:3 500V;毛细管温度:250℃;喷射压力:20.0 PSI;干燥气流速:8.0 L·min-1;干燥气温度:350℃;扫描质量范围:100~1700 amu。负离子模式。

参考文献略

文章摘自:《中国新药与临床杂志》2005年7月,第24卷,第7期
作者:刘世坤, 裴奇,李佐军,周于禄,李兵

日期:2007年5月18日 - 来自[色谱论文]栏目

人参皂甙Rg3对大鼠子宫内膜异位症组织中微血管密度的影响

2007年02月09日 中国妇产科临床杂志 2006 Vol.7 No.5 P.348-350,371 9 (太原)为了观察人参皂甙Rg3对大鼠子宫内膜异位症(EMs)组织中微血管密度(MVD)影响和抗血管生成作用。研究者参照Jones方法建立Wistar大鼠EMs动物模型,3周后将建模成功的大鼠随机分为空白对照、孕三烯酮和人参皂甙Rg3 各2、4、6及8周组共12组,通过CD31标记异位子宫内膜血管,用SABC免疫组化法测定异位灶组织中MVD的表达。结果 Rg3 治疗大鼠EMs模型2、4、6、8周后,异位组织中MVD数量明显低于对照组(P<0.05),而孕三烯酮治疗相同时间后与对照组相比,MVD数量无明显改变(P>0.05),Rg3并且随治疗时间延长,MVD数量明显减少(P<0.05),而正常对照组和孕三烯酮组无此表现。可见 Rg3 对大鼠EMs组织中MVD表达和新生血管生成均有抑制作用,Rg3有望成为EMs抗血管生成治疗新药。
日期:2007年2月9日 - 来自[药理学]栏目

“知母皂甙元抗老年痴呆研究”完成

        上海交通大学医学院细胞调控研究室和实验核医学教研室夏宗勤、胡雅儿、易宁育教授牵头完成的“知母皂甙元抗老年痴呆研究”,前不久通过上海市卫生局组织的专家鉴定。
  知母皂甙元(ZMS)由滋肾阴中药知母中提取、纯化获得。夏宗勤等经过多年研究,对ZMS的作用机理探索取得了重要进展:多种动物模型表明,ZMS确能改善学习记忆和认知功能,这种作用已经由多中心双盲法II期临床试验证实;作用原理在于显著提高脑内M1和M2亚型受体密度,使各重要脑区的受体密度向正常水平方向发展;作用的分子机理是提高mRNA的稳定性,使M1mRNA和M2mRNA水平升高,从而促进相关受体蛋白的表达;能显著改善或延缓老年动物脑组织和Ab毒性作用所致原代培养脑细胞的神经退行性变化;这种神经保护作用和它对脑源性神经营养因子BDNF的上调作用密切相关。
  研究证实,ZMS是具有独特作用机理的改善老年性痴呆的记认知功能的药物。它基于中医阴阳失衡的致病理论,又与西医关于神经退行性病变的学说相结合,是一项具有完全自主知识产权的创新性成果。
日期:2007年1月25日 - 来自[药学研究]栏目

提取三七茎叶花皂甙

   云南省文山县高登特安呐制药厂的研究人员研究出三七地上部分(茎叶花)所含皂甙的提取工艺。该提取工艺由以下步骤组成:取三七茎、叶、花,其中茎切成2~5cm小段,加水煮沸;减压浓缩,加入80%以上乙醇,分层,弃取沉淀;上述溶液回收乙醇至元醇味,加去离子水适量;通过大孔吸附树脂,去离子水洗涤至呈淡黄色;用50%~80%乙醇洗下皂甙,过氧化铝柱脱色;减压回收乙醇,喷雾干燥,得到三七茎叶花皂甙。
日期:2006年12月16日 - 来自[制药工艺与技术]栏目
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