玫瑰糠疹是一种以斑疹脱屑如糠秕状，四周呈玫瑰色为主的炎症性皮肤病。中医称为“风热疮”、“风癣”，春秋多见。以下验方可供选用：
1.金银花20克，连翘20克，荆芥10克，蝉蜕12克，酒黄芩10克，绿豆衣10克，枳壳12克，槐花10克。每日一剂，早晚两次，饭后冲服。适用于风热蕴肤证，症见发病急骤，斑疹呈淡红色，覆盖少量鳞屑，伴心烦口渴，大便干，舌红，苔薄黄，脉浮数。
2.生地黄20克，赤芍20克，牡丹皮12克，紫草20克，地骨皮20克，白鲜皮20克，蝉蜕12克，枳实6克。每日一剂，服法同上。适用于风热血燥证，症见斑疹鲜红或紫红，鳞屑较多，瘙痒较剧，伴抓痕血痂，舌红，少苔，脉弦数。
3.苦参60克，地肤子30克，白鲜皮30克，荆芥20克。上药开水冲泡后，加适量开水熏洗患处，每日1～2次。
4.紫草30克，加基质70克配成软膏，外搽患处，日两次。
5.川芎20克，羌活10克，肉桂6克，地龙5克。以陈醋调膏，贴脐，每日换药一次。（刘天骥 李征）
紫草是我国传统中药材，主要以野生品供应医药市场。上个世纪，紫草在药材市场上是个三类冷背品种，不为药商和药农所重视。21世纪之后，医药市场发生了历史性的变化，对紫草的需求量大幅增加，价格也随之同步大幅上涨，特别是近些年用量与价格持续攀升，成为广大药届同仁关注的焦点品种。紫草价格缘何连年上涨？笔者调查分析如下。
一、资源短缺，产量下降
据对医药市场调查显示，进入21世纪后，市场提供的紫草几乎完全是野生品，而人工栽培刚刚起步，产量低下，杯水车薪。从2001年起野生紫草资源呈逐年减少之势。据不完全统计，2001年野生紫草产量为3000-4000吨左右，2002-2003年下降至1000-1500吨左右，2006年再降至800吨左右，2009-2010年已降至500吨左右。野生紫草产量缘何直线下滑？调查显示：从2004年起，紫草价格由上世纪80年代的5-8元（千克价，下同），上涨至21世纪初的10-15元。在利益的驱动下，主产地东北三省、云南、新疆、湖南、湖北等省广大群众一哄而起，大规模地滥采乱挖，年复一年，循环不已，造成野生资源枯竭，产量大幅减少；为发展地方经济产区连年不断地修路架桥、建厂开矿、城市改造、小区建设、开荒造田、兴办旅游区等多项举措，导致野生资源遭到毁灭性的打击，产区已难见到连片的紫草；改革开放后，广大产区广大青壮年纷纷进城务工，农村缺少劳动力，少人采药，使产量减产过半；产区屡遭多种自然灾害，产量连年受损，加上当地政府为保护生态环境，严禁无证采运等，也使产量下滑速度加快。
二、用途拓宽，需求增加
据对市场调查，紫草已走出药用的单一领域，拓展至塑料、化工、食品、饮料、果酒、化妆品等多个领域。
紫草以根入药，具有凉血、活血、解毒透疹等功效。主治热病斑疹、麻疹不透、腮腺炎、尿路感染、便秘、肝炎、吐血、尿血等症；外治烧烫伤、冻伤、湿疹以及痈疖疮疡等症。紫草还有避孕、抗肿瘤作用和抗炎、保肝护肝等多种药理活性。由于紫草药用价值较高，我国2000多家中药厂和1000多家中药饮片厂以紫草为主要原料研制开发生产了约500多种（规格）中成药、特药、新型中药，以及几十种中药饮片。这些产品投入市场后很受消费者欢迎，销量增加，对紫草的用量逐年增长。我国几百家植物提取厂还用紫草加工提炼植物提取物，用于内销和外销，对紫草的需求量每年递增10%以上。随着各行各业科技进步和科技创新，利用紫草中的萘醌类天然色素在塑料产品中用作着色剂；化工行业将紫草天然色素作为添加剂用于香皂、肥皂、溶液、洗发液等产品之中；紫草中的萘醌类原素有很好的着色和防腐作用，许多食品、饮料、果酒等行业将其用于面点、冰点、糖果、饮料、果酒等之中；此外，紫草在化妆品中用于口红、胭脂、指甲油、发油、面霜等产品的着色。与此同时，我国紫草及其提取物还出口到日本、韩国、东南亚、俄罗斯、北欧等一些国家和地区，近年港澳台市场也增加了紫草的订购数量，需求成倍增长。
用途的拓宽，市场份额的增多，对紫草的需求量随之逐年大幅攀升。据不完全统计，紫草需求量2000年为100吨，2002-2004年增长至200-500吨，2005-2007年增长至700-1000吨，2008-2009年又增长至1100-1300吨，2010年已增长至1400吨左右。2010年的市场用量是世纪初叶的14倍，创下历史新高。预测今年市场用量将超过1500吨。
三、供求缺口，价格上涨
从2006年起，紫草的市场产销动态呈两极分化之势，一方面野生紫草资源枯竭，产量连年锐减；另一方面，紫草用途广泛，需求增多，产不足需，供需缺口连年扩大，紫草市场的两极分化态势导致供需矛盾加深，日趋尖锐，供给告急，敲响危机警钟。缺口即为商机，拉升价格逐年上涨。据对全国17家中药材专业市场紫草（软紫草、硬紫草）价格走势调查显示，从2006年起紫草价格逐年上涨，软紫草和硬紫草价格分别上涨至24-26元和10-12元，2007-2008年又分别上涨至31-34元和13-14元，2009年已涨至35-38元和16-21元。值得关注的是，进入2010年后紫草供给缺口加大，价格大幅上涨，到2010年底，已分别上涨至45-80元和25-70元，涨幅高于预期，分别是2006年的87.5%-207%和92.3%-169%，创下历史新高。
四、短缺已定，后市走高
紫草的不俗表现以使其成为各类市场上集卖点、热点 、亮点、焦点于一身的“优秀品种”。由于用途广泛，市场对紫草的需求量将持续增长，预测到2013年紫草的需求量将突破2000吨大关。但是紫草的市场供给量却呈逐年减少之势，到2013年野生紫草的产量将降至400吨以下，此间虽然有家种紫草补充市场，但家种品发展缓慢，远水解不了近渴，2011-2013年产量至多在1000吨左右，加上野生产量400吨，2013年紫草的社会存量最多达到1400吨左右，而市场需求量在2000吨以上，供需缺口多达600吨。缺口加大，矛盾难解，后市走强和价格走高是市场规律使然。市场人士预测紫草后市价格认为：2011年软硬两种紫草价格将分别上涨至50-85元和30-75元；2012年分别涨至60-95元和35-80元；2013年将涨至70-100元和45-85元。
基于紫草濒临危机，供给告急，业内资深人士建议：野生变家种是解决供需矛盾的唯一策略。人工种植紫草是一个很有发展前景的“朝阳产业”，是农村农业种植结构调整的一个好项目，更是农民脱贫致富奔小康的一个好品种。因此主产区政府有关部门应将紫草家种做为一件大事来抓，抓好抓实，并在资金、用地、技术、信息、销售等多方面给药农以优惠，鼓励适度扩种，增产增收；同时产区应组织龙头企业带头发展紫草家种，扩大种植面积，实行“GAP”规模化产业化生产，建设一批专业化紫草生产基地，生产出质量过硬，满足市场急需的紫草产品，为野生药材资源的可持续利用和家种紫草的新发展做出突出贡献。
压疮是长期卧床病人或长期坐位病人常见的并发症，是由于局部组织长期受压、缺血、缺氧，以致皮肤失去正常功能而导致的组织破损和坏死，故称之为“压力性溃疡”，以前曾称“褥疮”或“席疮”。近年来由于整体化护理和责任制护理的实施，临床中压疮病人有所减少，但长期卧床康复病人，如脑卒中后遗症病人、晚期癌症病人、骨折病人和一些高龄卧床老人仍有压疮的发生，故现将我们治疗的34例病人报告如下，以供参考。
1临床资料
1．1 一般资料 我们选择2003年6月-2006年5月的64例病人，均符合压疮的分期标准，为压疮第三期和第四期病人，其中脑卒中后遗症病人32例、晚期癌症病人12例、骨折病人11例、高龄卧床老人9例；发生部位多为肩胛部、脊柱体隆突处、骶尾部；面积约3cm×x6cm-5cm×12cm。随机分两组：治疗组34例，男19例，女15例，年龄38岁-88岁，平均68．7岁；对照组30例，男17例，女13例，年龄36岁-84岁，平均66．2岁。两组患者性别、年龄、病情、营养状况、体质均无显著差异，具有可比性(p>0．05)。
1．2治疗方法 两组病人均给予压疮常规护理，治疗前首先清洁疮面，去除坏死组织，保持引流通畅，每日给予1：5000呋喃西林溶液、庆大霉素溶液和甲硝唑溶液冲洗，并给予1-2次25W鹅颈灯疮面照射10-15分钟。治疗组加用中药加味紫草膏每日涂抹一次，并覆盖无菌纱布固定。
1．3疗效标准 治疗l周后疮面缩小50％以上或局部组织基本修复为显效；治疗2-3天渗出物减少，１周后创面缩小25-50％或创面变浅为有效；治疗1周后创面缩小不足5％、无明显变化或加重为无效。
2护理措施
2．1 基础护理 加强基础护理。严格细致地执行交接班制度。做到“六勤”，即勤观察、勤翻身、勤按摩、勤擦洗、勤整理、勤更换；要定时翻身，每2小时一次，翻身时避免拖、拉、推。以减少摩擦力和剪切力对皮肤的损伤，并保持病人皮肤和床铺的清洁干燥，对易出汗和大、小便失禁病人要及时擦洗和更换床单，使床铺平整、无碎屑，从而能有效地预防压疮的发生。
2．2营养与沟通 加强营养，增强抵抗力，促进压疮愈合，可给予高热量、高蛋白和富含维生素C及锌的食物，如新鲜蔬菜、水果、肉和鱼等满足病人的各种营养需要；并鼓励病人适当活动。可防止长期卧床不动而导致的各种并发症：有效沟通，及时纠正病人的各种负性不良情绪，多理解、多关怀、多安慰，耐心听取病人的倾诉，满足病人的身心需要．避免病人焦燥不安和无故发脾气等带来的不良影响。
2．3健康教育 对病人和家属介绍压疮的发生、发展和治疗的重要性及护理知识，使家人和参与护理人员要有耐心、爱心和同情心，特别是晚辈对长辈要有回报之心、感恩之心，不能恶语相加、雪上加霜，影响病情。只有精心护理，才能真正做到病人长期卧床无压疮，不因压疮感染等而危及生命。从而使病人安心康复、顺利恢复健康。
3结果
治疗组34例，显效19例，有效11例，无效4例，总有效率88．24％；对照组30例，显效8例，有效12例，无效10例。总有效率66．67％。经统计学处理，治疗组疗效优于对照组(P<0．05)。
4讨论
压疮是长期卧床不活动病人未经很好护理而出现的严重并发症，它不仅给病人带来极大的痛苦，还给社会和家庭带来一定的负担。因此要积极预防，并采取局部治疗为主和全身治疗为辅的综合防治措施。目前医院压疮的发生率为3％-14％，医护工作者为探索和治疗压疮仍在不断地努力，精心护理是预防和治疗压疮的关键，有效预防和治疗压疮也是评价护理质量和管理水平的一项重要指标。我们在常规护理和治疗的基础上加用中药加味紫草膏外用治疗压疮，为压疮的治疗增添了一种新的方法。该方采用明薛己《外科方》所载的“紫草膏” (香油、当归、紫草、白芷、红花、黄蜡)加生大黄、地榆、生甘草三味调制而成，诸药相配起到了凉血活血、清热解毒、收敛除湿、祛瘀镇痛、润肌止痒、生肌长皮的作用，从而能迅速提高疮面的愈合率，收效良好(x2=6．86，v=2，p<O．05)。故而值得临床应用。
紫草油具有清热凉血、消炎止痛作用，常外用于皮肤科和外科疾病中。用紫草油、当归、蜂蜜等做成药纱外用，可以治疗局部皮肤溃疡。
取芝麻油(大豆油、菜油亦可)750克~1000克，紫草100克，当归50克，地榆30克，白芷30克，冰片6克，蜂蜜250克，药用纱布剪成6厘米×8厘米大小。将紫草、当归、地榆、白芷切碎。放入芝麻油中发泡24小时。然启加热烧开，用慢火将以上药物炸至枯黄后，过滤其药渣，再加入冰片(碎成粉)和蜂蜜，搅匀即成，装瓶备用。再取纱条适量，平置于药缸内，将已混合的油药液倒入纱条上使其浸透(不要倒得过多，以不滴油为宜)。然后高温蒸煮消毒备用。油纱一次不宜做得太多．用完再做，以免存放易遭污染。
使用时，用75％酒精消毒患处。如有坏死组织。先用30％双氧水擦洗，再用生理盐水冲洗拭干。随后将油纱条覆盖患处2层～3层，最后用白绷带包上，胶布固定。每日换药1次，无感染者2天换1次，直至愈合。
【摘要】 目的 研究紫草素对肝癌细胞株HepG2增殖和表达增殖诱导配体（A proliferation-inducing ligand，APRIL）水平的影响,并与化疗药顺铂进行对比。 方法 MTT法检测紫草素对HepG2细胞增殖的抑制作用，采用免疫组化法和实时荧光定量PCR法证实肝癌细胞株HepG2上APRIL的表达，实时荧光定量PCR法检测加入不同终浓度的紫草素和顺铂后24h、48h和72h HepG2细胞表达APRIL mRNA的水平。 结果 紫草素对HepG2细胞有明显的增殖抑制作用，呈时间和剂量依赖性，HepG2细胞上有APRIL的表达，加入不同浓度的紫草素和顺铂后，HepG2细胞APRIL mRNA的水平均逐渐升高，至72h表达最高并与空白对照相比均有显著差异（P<0.05）。 结论 紫草素可抑制肝癌细胞的增殖，但与顺铂一样，残存癌细胞有因APRIL表达升高而增殖能力增强的潜在趋势。
【关键词】 紫草素 APRIL 肝肿瘤 实时荧光定量PCR
近年的研究显示紫草素及其衍生物有一定的抗肿瘤效应而没有化疗药物的副作用［1］,因其还可用于乙型病毒性肝炎的治疗，而我国的原发性肝癌多发生于慢性乙型病毒性肝炎和肝硬化，故研究紫草素在原发性肝癌中的作用及机理存在问题有一定的意义。增殖诱导配体（A proliferation-inducing ligand，APRIL），是肿瘤坏死因子超家族新成员，有重要的促进肿瘤生成和增殖的能力［2］。我们通过研究紫草素对肝癌细胞株HepG2增殖和表达APRIL水平的影响，从另一侧面对紫草素及APRIL的抗癌研究提出新的问题。
1 材料和方法
1.1 细胞株 肝癌细胞株HepG2为中山大学附属第三医院传染科实验室保存。
1.2 主要试剂及仪器 紫草素(BIOMOL公司)，顺铂(德州德药制药有限公司)，DMEM、新生牛血清（GIBCO公司），MTT：3-(4，5-甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐（上海生工），Trizol试剂（Invitrogen公司）,实时荧光定量RT-PCR试剂盒SuperScriptTM III Platinum SYBR Green One-Step qRT-PCR Kit（Takara生物技术有限公司），ABI 7000 Rael Time PCR扩增仪（ABI公司）。
1.3 肝癌细胞株HepG2上APRIL的表达 细胞培养液为含10%灭活新生牛血清的DMEM培养基，常规培养肝癌细胞株HepG2并传代。将HepG2细胞以1×105/ml接种于放有盖玻片的6孔板中，培养48h后用冷纯丙酮固定，采用SABC免疫组化法染色，具体步骤参照试剂盒推荐步骤进行，阳性染色为棕色细颗粒状，阳性细胞在5%以上定为阳性；另采用SYBR Green I嵌合荧光法进行实时一步逆转录-PCR反应以检测HepG2细胞APRIL的mRNA水平（方法见1.7）。
1.4 紫草素与顺铂对HepG2细胞增殖的影响 采用MTT法，取对数生长状态良好的HepG2细胞以1×104/ml接种于96孔板，每孔加入200μl细胞悬液，预培养12h，随后加入终浓度分别为0.029、0.288、2.88、5.76μg/ml的紫草素，及终浓度分别为2.5、5、10、20μg/ml的顺铂，每组设4个复孔，另设空白对照孔和阴性对照孔。于作用24、48、72h时，每孔分别加入5g/L MTT 20μl，37℃孵育4h，弃上清。每孔加入150μl二甲基亚砜，微振荡10min。应用POLARstar OPTIMA 多功能微板测试系统，于波长490 nm 处测得每孔的吸光度(A)，重复测量3次。计算细胞生长抑制率(%)=［1-(A药物组-A空白对照组)／(A阴性对照组-A空白对照组)］× 100，用抑制率对2种药物作用浓度对数做图，根据曲线方程求出各作用时间的半数有效抑制浓度（IC50）。
1.5 紫草素和顺铂对HepG2细胞表达APRIL mRNA水平的影响 取对数生长状态良好的HepG2细胞以104/ml接种于6孔板，预培养24h，随后加入终浓度分别为0.029、0.288、2.88μg/ml的紫草素和终浓度分别为5、10、20μg/L的顺铂，每组设3个复孔，另设空白对照孔不加任何药物。于作用24、48、72h时，Trizol消化收集细胞提取总RNA进行实时一步逆转录-PCR反应（方法见1.7）。
1.6 引物设计合成和标准曲线的构建 两对引物APRIL（5′-AAGGGTATCCCTGGCA GAGTC-3′，5′- GCGTTAATGGGAACCAGGTG-3′，148bp）；内参照β-actin（5′-TGGCACCCAGCACAATGAA-3′，5′-CTAAGTCATAGTCCGCCTAGAAGCA-3′，186bp），由Takara生物技术有限公司设计并合成。取中山大学附属第三医院传染科实验室建立并保存的pbluescript-HBV质粒，核酸蛋白紫外分析仪核酸定量，1：10倍比稀释作为标准品，与待测样本同时进行荧光定量PCR反应，以其Ct(域值循环数，threshold cycle)值与不同浓度标准品的对数值拟合作图，建立标准曲线。
1.7 HepG2细胞APRIL mRNA水平的检测 Trizol法提取组织和细胞总RNA，核酸蛋白紫外分析仪检测RNA质量和浓度，要求D260／D280在1.8～2.0，并调整RNA浓度至1ng/μl。实时荧光定量RT-PCR反应体系20μl，包括上下游引物各0.4μl，待测样本总RNA或标准品1μl，加入96孔板，设立空白对照和无模板对照，于ABI 7000 Rael Time PCR扩增仪进行反转录及PCR反应。反转录反应：42℃ 15min，95℃ 2min；PCR反应：95℃ 5s，60℃ 31s，40个循环。根据标准曲线，软件自动计算出待测样本中APRIL和β-actin的mRNA含量，以APRIL mRNA 和内参β-actin mRNA含量的比值作为评价APRIL mRNA表达水平的指标。
1.8 统计学分析 采用SPSS12.0统计软件，计量资料结果表示为均数±标准差，两组间计量资料采用t检验。
2 结果
2.1 紫草素与顺铂对HepG2细胞增殖的影响 随着紫草素与顺铂浓度升高及作用时间延长，对HepG2细胞增殖的抑制率也随之升高。其中紫草素在作用24h、48h、72h的IC50分别为 2.11μg/ml、0.83μg/ml、0.29μg/ml，顺铂在作用24h、48h、72h的IC50分别为37.4μg/ml、14.9μg/ml、6.2μg/ml。
2.2 肝癌细胞株HepG2上APRIL的表达 免疫组化结果显示，HepG2细胞胞浆可见明显的棕黄染色，细胞核未见染色（见图1），故HepG2细胞上有APRIL蛋白的表达。实时荧光定量RT-PCR结果显示，HepG2细胞APRIL mRNA表达值为0.46±0.05。
图1 APTIL在肝癌细胞株HepG2上的表达（免疫组化法）（略）
A：HepG2细胞，APRIL呈强弱不等的阳性表达（×100）；B：HepG2细胞，APRIL阳性染色主要定位于细胞胞浆（×200）
2.3 紫草素与顺铂对HepG2细胞表达APRIL mRNA水平的影响 以药物作用时间及HepG2细胞APRIL mRNA水平（均数±标准差）作曲线图（见图2），可见加入不同浓度的紫草素后，与作为对照的顺铂一样，HepG2细胞APRIL的mRNA水平均逐渐升高，至72h表达最高与空白对照（不加药物）相比有显著差异（均为P<0.05），其中2.88μg/ml的紫草素作用72h时，APRIL mRNA的相对水平高达0.83±0.06（与空白对照相比t=16.411，P<0.001）。
图2 紫草素和顺铂对HepG2细胞表达APRIL mRNA水平的影响（略）
3 讨论
原发性肝癌是最常见的恶性肿瘤之一，我国的原发性肝癌多发生于慢性乙型病毒性肝炎和肝硬化，发现时许多病人已处于中晚期，肝动脉插管化疗等措施成为必要手段。化疗药物毒性大、疗效有限且治疗后肿瘤易复发，故寻找副作用小且有效的联合治疗手段有重要意义。
紫草素及其衍生物是中药紫草的有效化学成份，近来的研究显示，它能抑制多种肿瘤细胞的生长［1］，其机理可能与通过激活Caspase蛋白酶家族、引起Bcl－2蛋白家族表达变化、抑制肿瘤坏死因子受体相关蛋白表达等途径导致肿瘤细胞的凋亡和抑制肿瘤血管生成等有关［3～5］。增殖诱导配体（APRIL）是肿瘤坏死因子超家族的新成员［2］，在正常组织中表达很弱，却在多种肿瘤细胞及组织有高效表达［2，6］。对肿瘤细胞的增殖作用是目前所认为的APRIL最主要和重要的功能，它可促进肿瘤的形成及肿瘤细胞的增殖与存活，保护肿瘤细胞不受某些死亡配体和肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体诱导而凋亡［6～8］，故它在肿瘤组织和细胞中的高表达被认为是肿瘤进展的因素之一。
在我们的研究结果中，与其他研究一样，紫草素能明显地抑制肝癌细胞HepG2细胞的增殖，但是，它在抑制HepG2细胞增殖或杀灭癌细胞的同时，残存细胞的APRIL mRNA的水平却越来越高，即预示残存癌细胞增殖能力可能一定程度上反而升高，我们同时用肝癌经典化疗药物顺铂作为对照，发现顺铂同样有类似的现象，故有必要进一步从蛋白等水平证实上述现象及其它化疗药物是否存在相似情况。
不论如何，紫草素具有抑制肝癌细胞增殖的功能且没有顺铂等化疗药物的副作用，具有一定的应用前景，但同时也提示，在运用紫草素或顺铂治疗原发性肝癌时，因为APRIL在癌细胞中存在高表达和治疗后残存细胞的APRIL mRNA水平进一步升高，同时辅予对抗APRIL功能的治疗措施可能具有潜在的重要作用。
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作者单位：中山大学附属第三医院消化内科，广东 广州 510630; 中山大学附属第三医院中医科，广东 广州 510630
【摘要】 目的 建立紫草软胶囊中左旋紫草素的含量测定方法。 方法 采用HPLC法，考证于不同流动相组合、流速及柱温等条件下测定紫草软胶囊中左旋紫草素的效果。 结果 以DIKMAODS C18(250mm×4.6mm，5μm) 色谱柱，以甲醇-水-甲酸（85：15：0.5）为流动相，流速1.0 ml·min-1，波长516nm，柱温25℃，进样量100μl。检测紫草软胶囊中左旋紫草素在10.2～35.3μg·ml-1浓度范围内线形关系良好（r=0.9997）；平均回收率为100.6 %，RSD=1.83%（n=5）。 结论 所建立的HPLC实验方法简便、检测结果准确，可用于紫草软胶囊的质量控制和评价。
【关键词】 紫草软胶囊 左旋紫草素 HPLC 含量测定
紫草为紫草科多年生草本植物新疆紫草(软紫草)Arnebiaeuchroma、紫草(硬紫草)Lithospermumerythrorhizon.或内蒙紫草Arnebiaguttata.的干燥根。始载于《神农本草经》,味苦,性寒,功效以凉血活血、解毒透疹见长,乃愈创要药,对疮疡、水火烫伤［1］等创面有独特疗效。紫草主要成分为紫草素,具有抗炎［2］、促进肉芽组织生成［3］、抗肿瘤等药理作用。本实验采用HPLC法对紫草软胶囊中左旋紫草素进行含量测定,经多种流动相系统筛选,最终确定本实验规定的色谱条件,左旋紫草素与其他萘酚类成分色谱峰得以完全分离,方法简单、快速、准确,为控制紫草的内在质量提供了可靠的方法。
1 材料与方法
1.1 仪器与试药 Waters600高效液相色谱仪,2487可见紫外检测器,EC2003色谱数据处理系统。AL204万分之一电子天平（梅特勒公司）。左旋紫草素对照品由中国药品生物制品检定所提供（批号：110769－200405）。紫草软胶囊由北京东方慧能公司提供。甲醇为色谱纯,甲酸、氢氧化钠等均为分析醇。
1.2 试样溶液的制备
1.2.1 对照品溶液 精密称取紫草素对照品0.00889g,于25ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，即得对照品贮备液。
1.2.2 供试品溶液 取10粒软胶囊的内容物，置分液漏斗中,加1%氢氧化钠溶液提取3次,每次100ml,合并碱液,加10%盐酸调pH值至酸性,加氯仿提取4次,每次30ml，合并氯仿液,水浴蒸干,残渣加甲醇溶解并定量转移至10ml量瓶中,加甲醇至刻度。以20ml甲醇萃取，共萃取三次，合并甲醇液，蒸干得到0.7012g，精密称取供试品15.6mg置10ml容量瓶中，加甲醇定容，得到浓度为1.56mg·ml-1的溶液。
2 结果
2.1 色谱条件 采用DIKMAODS C18(250mm×4.6mm，5μm) 色谱柱,以甲醇-水-甲酸（85：15：0.5）为流动相；流速1.0 ml·min-1；检测波长516nm；柱温25℃；进样量100μl。各测试物显示结果见图1。
图1 各测试品HPLC测定图（略）
2.2 线性范围 分别精密吸取对照品贮备液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.6ml置10ml量瓶中,加甲醇定容,得浓度分别为0.0071、0.0142、0.0213、0.0284、0.0356mg·ml-1的对照品溶液，在上述色谱条件下分别进样100μl,记录峰面积。以进样量为横坐标,3次测定峰面积的均值为纵坐标作图,得回归方程Y=26278x-4546，r=0.9997。在8.5～35.3μg·ml-1浓度范围内线形关系良好。
2.3 精密度试验 取同一浓度的紫草素对照品溶液,在上述色谱条件下测定,重复进样6次,测定结果RSD为1.56%(n=6)。结果表明进样精密度良好。
2.4 稳定性试验 取供试品溶液,分别于配制0、4、8、16、24h依法测定,结果RSD为0.7947%(n=5)。
2.5 回收率的测定 取紫草软胶囊10粒按2.2.2项下方法测定。左旋紫草平均回收率为100.6%,RSD=1.97%(n=5)。
2.6 空白实验 取去除紫草的大豆油软胶囊阴性制剂,按制备项下方法制得阴性对照液,以上述色谱条件测定。结果阴性对照液与紫草素相同保留时间处,无色谱峰出现。
2.7 样品含量测定 取紫草软胶囊三批种各10粒,依法制成供试品在上述色谱条件下测定，计算峰面积，外表法计算左旋紫草素的含量，测定紫草素含量见表1。
表1 紫金软胶囊中左旋紫草素的含量测定（略）
3 讨论
3.1 提取方法的选择 紫草软胶囊主要含有紫草的有效成分为紫草素及其衍生物，而紫草素的主要药用成分是左旋紫草素。据文献记载［4,5］，由于左旋紫草素属于萘醌色素类化合物，且醌类分子中具有酚羟基，具有酸性，能溶于碱性溶液中，加酸酸化后又可析出。利用此性质，将左旋紫草素与油性基质进行初步分离，加酸酸化后，使左旋紫草素析出，可将左旋紫草素提取并纯化。本实验证明，加 1%氢氧化钠溶液提取，加碱后，溶液变蓝，可根据溶液颜色深浅的变化，判断是否提取完全；加盐酸酸化后，溶液变红，加氯仿提取时，也可根据溶液的颜色判断是否提取完全。另，采用1%氢氧化钠溶液提取时，易发生乳化，不利于提取，因此不宜剧烈振摇。
3.2 测定方法的选择 左旋紫草素的主要测定方法有紫外法、薄层扫描法［6］、HPLC法，本实验采用高效液相色谱法测定左旋紫草素的含量，经多种流动相系统筛选,最终确定本实验规定的色谱条件,左旋紫草素与其他萘酚类成分色谱峰得以完全分离, 方法简单、快速、结果准确，重现性好，可用于本品的质量控制。
【参考文献】
［1］ 叶碧波,胡明.紫草的研究概况［J］.中国中医药科技,1997,(5):320～321.
［2］ 周灵珊,王风华.紫草的临床应用［J］.内蒙古中医药,1998,4:39～40.
［3］ 熊晓刚.紫草在皮肤病临床应用举隅［J］.甘肃中医,2000,5:55.
［4］ 孟宪生，沙明，曹爱民，等.HPLC法测定紫草及其制剂紫金油中左旋紫草素的含量［J］.中草药,2003,34(7):615～616.
［5］ 姚水宝，黄小华，杨水新.紫草油膏中左旋紫草素的含量测定［J］.中国医院药学杂志,2006,26(7):902～903.
［6］ 刘芳，王小平，伍伟祯.薄层扫描法测定烧伤膏中左旋紫草素的含量［J］.2001,15(2):21～22.
作者单位：海南省药品检验所，海南 海口 570216； 北京联合大学生物化学工程学院，北京 100023
【摘要】 目的：探讨紫草油治疗压疮的效果。方法:将48例Ⅱ～Ⅳ期压疮患者随机分为观察组与对照组。创面处理后观察组敷以无菌紫草油纱布，对照组敷以庆大霉素与胰岛素浸泡的无菌纱布。结果:观察组治愈率显著优于对照组（P<001）,治疗时间显著短于对照组（P<001）。结论:应用紫草油治疗压疮收到良好效果。
【关键词】 紫草油 压疮 护理
如何有效、快速治疗压疮是临床仍在探讨的课题［1，2］，2004年3月至2008年3月我院骨外科、康复科、泌尿外科采用紫草油治疗压疮疗效满意。现报告如下：
1 资料与方法
11 一般资料 本组压疮患者48例，其中，男36例、女12例；年龄69～84岁，平均765岁。均为住院前带入压疮，按照压疮诊断标准，Ⅱ期20例，Ⅲ期26例，Ⅳ期2例，压疮部位为骶骨25处，髂骨8处，肩胛骨8处，足根部4处，外踝3处，面积3～28（212±65）cm2。将48例患者随机分为观察组和对照组，两组患者疾病种类、年龄、性别、压疮部位、压疮分期及面积比较，差异无显著性意义（P>005）。
12 方法
121 治疗方法 两组均系统治疗原发病及并发症。Ⅱ期压疮以无菌注射器抽出水泡内液体；Ⅲ、Ⅳ期压疮有脓性分泌物者先用3%过氧化氢液冲洗创面，再用无菌生理盐水清洗，然后以无菌镊子或剪刀清除坏死组织。观察组创面常规处理后，以紫草油纱布覆盖创面，并以无菌敷料包扎；对照组创面常规处理后用庆大霉素溶液8万单位加胰岛素12单位浸泡无菌纱布敷于创面，并以无菌敷料包扎。换药均1次/d。
122 评价指标 ①治疗效果：用药30d观察两组疗效。创面愈合、痂皮脱落为治愈；创面缩小、无分泌物、有肉芽组织生长为显效；渗出液减少、创面无扩大为有效；创面扩大、渗出液增多为无效。②治愈时间。
123 统计学方法 数据采用χ2检验及t检验。
2 结果
21 两组疗效比较 见表1。观察组的治愈率高于对照组(χ2＝6857，P＜001)。
表1 两组疗效比较（略）
22 两组压疮治愈时间比较 观察组治愈时间为（217±75）d,对照组（347±109）d。两组比较，差异有显著性意义（t=48，P<001）。
3 讨论
中医认为，长期卧床不起，久病气血虚，又因受压部位气血失于流通，不能濡养肌肤，以致引起局部溃烂。如人体抗病能力低下，病邪不能及时得到控制，则进一步形成热胜肉腐，肉腐为脓，从而导致压疮形成［3，4］。现代医学认为，压疮产生的原因中压力是最重要的致病因素，当持续压力引起组织缺血时任何温度的升高都将增加压疮的易发性。此外，重度营养不良、摩擦力、剪切力及潮湿等也是引起压疮的重要因素。传统的换药方法费时、费力，创面常经久不愈。虽然胰岛素能促进细胞的代谢，营养创面，利于肉芽组织的生长，但是用于老年营养状态差的患者，愈合时间仍然较长，疗效不甚理想。紫草油是利用紫草、冰片、蜂蜡、香油为主要原料。依据清热祛火毒、活血生肌、祛腐的理论配伍，以紫草为主要成分配制而成的中草药制剂，具备止血、凉血、活血、生肌、祛腐滋润的功效。芝麻油是半乳化状态，无吸水作用，亦不影响水分挥发，故不会造成局部皮肤潮湿或干燥皲裂。因此，用紫草油治疗压疮可以减少创面渗出液，保护创面，促进毛细血管形成及表皮脱落处肉芽生长，缓解疼痛，加速创面修复和愈合，对压疮有显著的治疗效果。
【参考文献】
［1］ 文旭东，胡晓云.乌泡刺治疗Ⅲ期压疮疗效观察［J］护理学杂志，2000，15(11)：675-676
［2］ 山东中医学院中药方剂研究室.中药方剂学［M］济南：山东人民出版社，1986：191，802
［3］ 刘承梅，陈秀敏.血竭散治疗压疮的疗效观察及护理体会［J］中华护理杂志，1998，33（9）：524-525
［4］ 李惠敏，吴玉芳.复方中药煎剂治疗创面的临床观察［J］中华护理杂志，1998，33（80)：469-470
作者单位：佳木斯中医院骨科，黑龙江 佳木斯 154000；佳木斯中心医院
紫草，亦称紫草根，性味甘成寒．人肝、肾、心包三经。具有凉血活血、清热解毒透疹之功效。笔者在临床上用紫草外用治疗多发皮肤科疾病，均获显效。现介绍如下：
治痤疮：取紫草、大黄名等份，共研成细末，加入茶油浸泡5天即可使用。用时每次于洗脸后，以少量药油涂患处，每日3次。
治结节性红斑：取紫草，赤芍、当归、红花、白芷各30克，羌活、防风各15克。共研细末，以蜂蜜或醋调和外用患部。
治小儿尿布皮炎：取紫草150克，植物油1000克。将紫草加入植物油中浸泡24小时，以文火炸至焦黄，滤过即得。用时将药油搽于患处，每日2次。
治手足皲裂：取紫草、白芨各30克。共研细末，用时局部洗净拭干．取上药末少许加蜂蜜适量调成糊状。每日3-5次涂抹于患处。必要时包扎．治愈为止。
