主题:链球菌

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链球菌感染

 链球菌是化脓性球菌的另一类常见的细菌,广泛存在于自然界和人及动物粪便和健康人鼻咽部,大多数不致病。医学上重要的链球菌主要有化脓性链球菌、草绿色链球菌、肺炎链球菌、无乳链球菌等。引起人类的疾病主要有两类:一类是感染性疾病,如急性扁桃体炎、脓皮病、肺炎等;另一类为变态反应性疾病,如急性肾小球肾炎等链球菌感染为人类常见疾病,不仅遍及世界各地,而且四季均可发生。
基本知识

医保疾病: 否

患病比例:0.001%

易感人群: 无多发人群

传染方式:无传染性

并发症:急性肾功能衰竭 心力衰竭 高血压脑病
治疗常识

就诊科室:传染科

治疗方式:药物治疗 康复治疗

治疗周期:1-2个月

治愈率:20%

常用药品: 乳酸左氧氟沙星片 阿奇霉素分散片

治疗费用:根据不同医院,收费标准不一致,市三甲医院约(5000——10000元)
温馨提示

增强体质,改善身体防御机能,保持环境卫生,以减少上呼吸道感染。

日期:2018年3月11日 - 来自[感染与传染病科]栏目
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科学家合成了针对8型肺炎链球菌的多糖疫苗

8型肺炎链球菌是一种可引发严重肺炎和脑膜炎的高毒性细菌,且常对现有抗生素显现出耐药性。为合成针对这种细菌的疫苗,马克斯·普朗克协会下属的胶体与界面研究所领导的一个国际团队筛选出了细菌上被相关抗...即将发布

日期:2017年3月15日 - 来自[新药]栏目

微生物所揭示猪链球菌纤连蛋白结合蛋白的结构及功能

图1:全长FBPS蛋白的整体结构

图2:FBPS活化宿主的促炎症反应

中国科学院微生物研究所高福团队最新研究揭示了猪链球菌纤连蛋白结合蛋白(fibronectin/fibrinogen-binding protein from Streptococcus suis,FBPS)的结构及功能。该项工作发表在11月7日的《美国国家科学院院刊》(PNAS)上。Abednego Moki Musyoki(肯尼亚籍留学生)、史忠玉和宣春玲为该文章的共同第一作者。

猪链球菌(Streptococcus suis)是一类重要的人畜共患病病原菌。该研究团队之前的研究发现猪链球菌感染可引起中毒性休克综合征(PLoS Medicine,2006),对人类健康威胁极大。目前没有疫苗能够有效预防人类感染这种细菌。纤连蛋白结合蛋白(fibronectin-binding proteins, FnBPs)是一类在细菌表面广泛存在的保守组分,在许多革兰氏阳性细菌中能够识别粘附宿主细胞的基质分子,诱导炎症因子的产生。目前已知两类FnBPs,一类可共价锚定于细菌表面,另一类没有前导序列和锚定序列,属于无锚定粘附素。无锚定FnBPs是重要的毒力因子,然而对这类蛋白与宿主纤连蛋白相互作用的分子机制及功能还没有阐明。

高福研究团队成功解析了猪链球菌FBPS蛋白N端及C端的晶体结构,并利用小角散射方法把两部分结构整合得到全长蛋白的结构(图1)。FBPS的N端和C端分别包含两个结构域,整体结构呈顺式构象,如同人的手臂一般。进一步研究发现FBPS C-末端结合宿主纤连蛋白,N-末端附着于细菌表面,从而促进猪链球菌结合宿主细胞,发挥着细菌毒力因子的作用;同时还发现FBPS与纤连蛋白相互作用能够活化β1整合素受体信号通路(图2),诱导炎症因子IL-6和IL-8的产生。这一工作填补了国内外对无锚定FnBPs研究的空白,为今后设计靶向FBPS的药物奠定了结构基础及理论依据。

日期:2016年11月14日 - 来自[技术要闻]栏目
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8分钟检测A群链球菌感染 Alere分子诊断试剂获FDA批准

美艾利尔(Alere)公司开发的诊断试剂Alere i Strep A test日前获得了FDA批准,用于A群链球菌的检测,最多8分钟就能从咽拭子标本中检测出患者是否发生感染。

“Alere i Strep A test能让临床诊断变得快速、高效、准确,及时给出恰当的治疗方案。避免盲目滥用抗生素,提高患者治愈率。”美艾利尔传染病业务部全球总监Avi Pelossof在新闻发布会上这样说道。

美艾利尔也提交了《临床实验室改进修正案》(CLIA)豁免申请,希望能在除一般实验室外的场所应用该试剂盒,比如医生办公室、医院急诊科以及健康诊所。

这个试剂盒应用了美艾利尔的专利技术—核酸等温快速扩增技术,与普通的聚合酶链式反应(PCR)不同,这项新技术不需要反复的热循环以及复杂的DNA纯化,在较宽的条件范围内,能快速扩增核酸分子,给出结果。

同样使用该技术的产品还有流感病毒检测试剂盒。2014年6月,美艾利尔对于A型和B型流感病毒的检测和分型试剂盒获得了FDA批准。2015年1月,美艾利尔流感病毒检测试剂盒被授予CLIA豁免权。

“Alere i Strep A test增加了Alere i平台的检测项目,扩大了适用人群。”美艾利尔公司负责人说,“A群链球菌缺少季节特征,全年范围内都可能发生感染,人们应该及时用Alere i Strep A test进行检测。”

日期:2015年4月7日 - 来自[新药]栏目

辉瑞旗下肺炎链球菌疫苗的扩展应用在欧洲获批

辉瑞表示,旗下肺炎链球菌疫苗Prevenar13的扩展应用获得欧洲卫生监管部门的批准,从而使该疫苗的适用人群更加宽广,可用于18至49岁的成年人。这款疫苗之前在欧洲被批准用于婴儿、幼儿和年龄在6星期至17岁的青少年及50或50岁以上成年人。

Prevenar用于预防肺炎链球菌的13个菌株,肺炎链球菌能引起肺炎、耳朵感染,甚至致命的疾病,如肺炎球菌脑膜炎。这款疫苗在120多个国家被批准用于婴儿和幼儿,在80多个国家被批准用于50岁及其以上的成年人。今年1月份,美国食品药品管理局(FDA)批准这款疫苗用于儿童和年龄在6岁至17岁的青少年。

Prevnar是辉瑞第三大品牌药物。

日期:2013年7月15日 - 来自[新药]栏目
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肺炎链球菌性疾病防治亟待加强

日前,“爱在百天——中国宝贝健康行动”肺炎链球菌性疾病健康教育与健康传播项目在京启动。与会专家表示,肺炎链球菌性疾病是一种严重影响儿童生命健康的感染性疾病,我国对其重视程度亟待加强。

中国疾病预防控制中心流行病学首席科学家曾光教授说,肺炎位列我国5岁以下儿童死因的第2位,大约有一半的重症肺炎由肺炎链球菌引起。同时,肺炎链球菌性疾病还可能导致耳聋、瘫痪、智力低下等严重后遗症。北京儿童医院研究员、首都医科大学杨永弘教授介绍,肺炎链球菌广泛分布于自然界,可通过咳嗽或打喷嚏传播并长时间潜伏在人体内,发展中国家婴幼儿鼻咽部携带率高达85%。

杨永弘介绍,由于肺炎链球菌性疾病的高发病率、高致残率、高死亡率,世界卫生组织已将其列为需“极高度优先”使用疫苗预防的疾病;而且肺炎链球菌抗生素耐药形势严峻,并呈逐年上升趋势,接种疫苗是降低其耐药率的有效手段之一。目前,全球已有超过60个国家和地区将肺炎链球菌性疾病的预防纳入儿童免费免疫规划,大大降低了两岁以下儿童患相关疾病的比例。在我国,相关疫苗仍属需自费接种的二类疫苗。

该项目由原卫生部疾控局指导,中国健康教育中心联合中华预防医学会、中华医学会儿科分会共同承担,旨在提高家长对儿童肺炎链球菌性疾病的认识,加强公众对及时全程接种疫苗、预防相关疾病的重视。

日期:2013年5月3日 - 来自[保健常识]栏目

抑制消减杂交技术筛选肺炎链球菌多耐药相关DNA片段

【摘要】  目的 筛选肺炎链球菌多耐药相关DNA片段,探索肺炎链球菌多耐药的分子机制。方法 提取多耐药菌株09062407与标准菌株ATCC49619基因组DNA, 应用抑制性消减杂交技术得到富含差异DNA片段的消减混合物,与pEASYT3克隆载体连接并转化到TP10感受态细胞中,构建多耐药肺炎链球菌差异DNA消减文库。结果 耐药株与敏感株间差异片段大量富集,得到大小200~1 500 bp弥散状DNA条带;将这些差异DNA片段富集后构建成消减文库,随机挑取192个白色克隆,经PCR扩增,155个克隆插入有200~800 bp大小片段。结论 抑制消减杂交技术能有效筛选肺炎链球菌多耐药株与敏感株间差异DNA片段,可进一步通过克隆鉴定等生物信息学方法寻找与肺炎链球菌多耐药相关基因。

【关键词】  抑制消减杂交;DNA 文库;肺炎链球菌;多耐药

【Abstract】 Objective To screen multidrug resistance(MDR)associated DNA fragments for providing insight into the molecular mechanism of multidrug resistant streptococcus pneumonia. Methods The genomic DNAs were purified from MDR 09062407 and ATCC 49619. The mixture of subtracted DNA fragments were obtained using suppression subtractive hybridization (SSH) and were ligated with pEASYT3 vector and transformed to competent cells TP10. Then the differential subtraction library was constructed. Results The fragments from 200 to 1500 bp were enriched in streptococcus pneumonia MDR,155 positive clones included 192 randomly selected clones were screened out inserted DNA sequence by PCR. The length of the inserted fragments was from 200 to 800 bp. Conclusions SSH technique can efficiently identify differential DNA fragments between MDR and susceptible strain in streptococcus pneumonia. Many bioinformatics methods will be used to analyze and find genes associated with MDR.

  【Key words】 Suppression subtractive hybridization;DNA library;Streptococcus pneumonia;Multidrug resistance

  近年来,肺炎链球菌(streptococcus pneumoniae,S.pn)对常用抗菌药物的耐药情况日趋严重,特别是对青霉素类、大环内酯类、四环素类、复方磺胺甲恶唑以及氯霉素等3种以上抗菌药物耐药的多耐药菌株(MDR)的出现,使肺炎链球菌所致重症感染的治疗成为难题。筛选肺炎链球菌多耐药相关DNA进行分析,有助于肺炎链球菌多耐药的分子机制研究,以及新的抗多耐药菌株药物靶点的设计。抑制消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH)是一种消减杂交与PCR结合的简单、快速分离差异基因的新技术[1]。经过不断改进和完善,已成为目前分离新基因的主要方法,是筛选耐药相关基因的有效手段。本研究以临床分离的肺炎链球菌多耐药菌株和抗生素敏感的标准菌株为研究对象,通过抑制消减杂交技术获得与多耐药相关的DNA片段,为进一步研究肺炎链球菌多耐药分子机制打下基础。

  1 材料和方法

  1.1 材料

  肺炎链球菌多耐药菌株09062407分离自四川大学华西医院,KB法药敏试验结果显示对四环素、阿奇霉素、氯霉素、克林霉素、复方磺胺甲恶唑均耐药。肺炎链球菌标准菌株ATCC49619由四川大学华西医院微生物实验室保存并提供,为上述抗菌药物敏感株。聚合酶链反应(PCR)选择性细菌基因组消减试剂盒购自Clontech公司,RsaⅠ酶购自MBI Fermentas公司,pEASYT3克隆试剂盒购自全氏金公司,BM 2000分子量标准、2×PCR Master Mix、柱式DNA回收试剂盒、柱式质粒DNA提取试剂盒、TP10感受态细胞购自博迈德公司,PCR扩增仪为Thermo公司产品,冷冻离心机为Beckman公司产品,电泳仪及凝胶成像系统为BioRad公司产品。

  1.2 方法

  基因组DNA提取及RasⅠ酶切。采用改进的十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)法[2]提取细菌基因组DNA。分别将多耐药菌株09062407 和ATCC49619基因组DNA用RsaⅠ酶切,酚/氯仿抽提,无水乙醇沉淀,调整DNA浓度为300 ng/μl备用,酶切效果良好方可进行后续实验。抑制消减杂交采用PCR选择性细菌基因组消减试剂盒,实验所用接头及引物见表1。表1 接头及引物序列

  2 结果

  2.1 RsaⅠ酶切、接头连接效率分析

  未经RasⅠ酶切的基因组DNA存在5kb弥散带,酶切后的产物弥散带在0.1~2.0 kb,酶切效果良好;将酶切产物分别与接头1、接头2R连接后,以23SRNA作为检查接头连接效率的基因,结果发现连有接头与未连接头的23SRNA基因的荧光强度相差不大,两者荧光强度之比小于4倍,连接效率>25%,符合后续实验要求。结果见图1。接头连接的成功与否是消减杂交成败的关键,如果连接效率<25%,应重新做连接实验。图1 接头的连接效率分析

  2.2 抑制消减杂交结果

  经过两轮消减杂交后的产物做两次抑制性PCR,第一次PCR产物少,且弥散,第二次PCR后,差异片段大量富集,电泳结果出现弥散分布带,大小200~1 500 bp,其中有明显富集的条带。结果见图2。图2 抑制消减杂交结果

  2.3 消减效率分析

  消减效率分析以23SRNA管家基因在抑制性消减杂交产物中的丰度为参考,结果见图3。从图3可以看出,消减后的耐药株在28次循环后才看到23SRNA产物,说明消减效率良好。图3 消减效率检测结果

  2.4 消减文库构建结果

  第二次PCR产物经纯化回收后和pEASYT3克隆得到经蓝白斑筛选的消减克隆库。随机挑取192个白色克隆应用巢式引物l和巢式引物2R进行PCR后有155个克隆(阳性克隆的比例达80.7%)能扩增出单一片段,大小200~800 bp不等,图4显示其中9个克隆进行PCR扩增产生的片段情况。图4 菌落PCR结果

  3 讨论

  国内研究显示我国肺炎链球菌多耐药情况十分严峻,如上海地区2008年细菌耐药性监测网的监测结果显示:568株儿童非脑膜炎肺炎链球菌中对青霉素不敏感率达21.5%,对红霉素和克林霉素耐药率则可达93.1%~97.8%,复方磺胺甲恶唑85.3%[3,4]。目前已知肺炎链球菌对青霉素的耐药机制主要是通过细菌青霉素结合蛋白基因突变,从而改变细胞壁上高分子量青霉素结合蛋白(PBP)结构, 减少其对抗生素分子的亲和力而产生;对大环内脂林可酰胺链阳菌素类(MLS)药物的耐药机制主要是erm基因介导的核糖体甲基化修饰,可明显降低细菌与MLS类的结合能力以及主动泵出基因mef介导的主动外排作用;对喹诺酮类药物的耐药机制主要是由于2种拓扑异构酶DNA转旋酶和 DNA拓扑异构酶Ⅳ活性位点的共同改变[5,6]。但是否存在多耐药相关基因及其他耐药机制有待进一步研究。比较耐药株与敏感株之间的基因组差异,无疑对鉴定那些只在耐药株中存在的可能与耐药相关的基因区域有很大帮助,可以对肺炎链球菌耐药机制的深入研究开辟一条新途径。

  抑制消减杂交技术是由Diatchenko建立的一种消减杂交与PCR结合的简单、快速分离差异基因的新技术。其运用杂交动力学原理,即丰度高的单链DNA在退火时产生同源杂交的速度快于丰度低的单链DNA,从而使不同丰度的单链DNA得到均衡;抑制PCR则利用链内退火优于链间退火的优点,使非目的基因片段两端反向重复序列在退火时产生类似发卡的互补结构,无法作为模板与引物配对,选择性地抑制了非目的基因片段的扩增,从而使目的基因得到富集、分离,在一次抑制消减杂交反应中,可同时分离成百的差异基因,实现两个基因群之间的完整对比。因而,抑制消减杂交具有高特异性、高灵敏度、高效率等优点。经过Akopyants等[7]对抑制消减杂交技术的改良,用于细菌基因组比较分析,为病原体中未知基因的筛选和微生物基因组差异、分子进化的研究提供了重要的技术手段。目前,抑制消减杂交已用于细菌致病基因分离与鉴定[8]、细菌毒力差异及细菌种属进化关系的研究[9,10]等。

  本次实验中以临床分离的多耐药菌株基因组DNA为被检方,标准菌株ATCC 49619 基因组DNA为驱动方,通过抑制消减杂交,剔除了相同基因片段,而使耐药株与敏感株间差异片段大量富集,电泳结果出现弥散状分布DNA条带,大小200~1 500 bp,这些差异强化带可能包含有被检菌独有而参考菌缺如的片段,即与多耐药相关的DNA片段。将这些DNA片段富集后通过与pEASYT3载体连接得到消减文库,随机挑取192个克隆经PCR扩增后有155个克隆能扩增出单一的DNA片段,大小200~800 bp不等,提示这些阳性克隆可能插入了高特异性的目的片段,可进一步通过克隆杂交、测序、基因结构分析、蛋白质位点及序列预测等生物信息学方法探寻肺炎链球菌多耐药相关基因及机制。

【参考文献】
   [1] Diatchenko L, Lau YFC, Campbell AP,et al. Suppression subtractive hybridization:a method for generating differentially regulated or tissuespecific cDNA probe and libaries[J]. Proc Natl Acad Sci USA, 1996,93(5):60256030.

  [2] 王关林.植物基因工程[M].第2版. 北京: 科学出版社, 2002:742742.

  [3] 朱德妹,汪复,张婴元,等.2008年上海地区细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志, 2009, 9(6):401411.

  [4] 黄义山,刘淼,方莉,等. 肺部铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌感染者临床疗效评价[J]. 成都医学院学报,2010,5(2): 155157.

  [5] 徐敏,张建华,藏国庆.肺炎链球菌对抗菌药物耐药机制研究进展[J].中国感染与化疗杂志, 2008,8(2):152156.

  [6] 张在亭. 肺炎链球菌耐药趋势及耐药机制研究进展[J].国际儿科学杂志,2007,34(1):4042.

  [7] Akopyants NS, Fradkov A,Diatchenko L,et al.PCR based subtractive hybridization and differences in gene content among strains of Helicobacter pylori[J].Proc Natl Acad Sci USA, 1998, 95(10): 1310813113.

  [8] Dai J,Wang S,Guerlebeck D, et al.Suppression subtractive hybridization identifies an autotransporter adhesin gene of E.coli IMT5155 specifically associated with avian pathogenic Escherichia coli (APEC)[J]. BMC Microbiol Antimicrob,2010,10:236239.

  [9] Williams HL, Turnbull L, Thomas SJ,et al.A diagnostic PCR assay for the detection of an Australian epidemic strain of Pseudomonas aeruginosa [J].Ann Clin Microbiol Antimicrob, 2010,9:18.

  [10] Park HK, Lee SJ, Yoon JW, et al.Identification of the cpsA gene as a specific marker for the discrimination of Streptococcus pneumoniae from viridans group streptococci[J]. J Med Microbiol, 2010:59(Pt10):11461152.

日期:2013年2月27日 - 来自[2010年第5卷第4期]栏目
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链球菌中毒性休克综合征1例

【关键词】  链球菌中毒性休克综合征;诊断;治疗

  近年来链球菌引起中毒休克综合征已有较多报道,笔者收治1例,现报告如下。

  1病例资料

  患者,女,3岁。因发热、腹泻4天,尿少3天入院。患儿入院前10天发热,体温最高39℃,无咳嗽。伴腹泻,为黄色稀便,量中等,每日2~3次。入院前3天出现尿少,尿色为茶色尿,眼睑、下肢水肿。门诊以“急性肾功能衰竭”收入院。查体:BP 80/40mmHg,P 130次/min,T 37.8℃,R 32次/min。精神反应弱,嗜睡,躯干、四肢可见散在淤斑,压之不褪色。双眼睑水肿,咽充血,心肺未见异常。腹软,肝脾不大,双肾区叩痛(+),双下肢轻度水肿,项强(-),克氏征(-),布氏征(-)。既往体健。入院后急查血常规:WBC 20.64×109/L,N 95.1%,RBC 3.63×1012/L,HGB 100g/L,PLT 39×109/L。肾功:CRE 271.0μmol/L,BUN 21.0mmol/L。心肌酶、肝功正常。血气分析:pH 7.27,PCO2 21.7mmHg,PO2 55.2mmHg,BE -17.2mmol/L,HCO3- 8.9mmol/L。肺CT右下肺见小云絮影,考虑肺炎存在。尿常规:葡萄糖(-),蛋白(+++),潜血(+++),白细胞(+++)。入院后给予盐水扩容,输注新鲜冰冻血浆、罗氏芬静点及给予碳酸氢钠静点纠酸治疗,血压恢复正常,酸碱平衡。入院后仍反复发热,给予丙球静点5天,血小板正常。患儿入院第10天双手大片脱皮,入院第11天心脏彩超提示二尖瓣腱索强回声团块,入院第15天抗“O”:284.0IU/ml,增高,支持链球菌感染。最后诊断链球菌感染中毒休克综合征,最后升级抗生素为美平,经治疗后好转出院。

  2讨论

  Willoughby首次报告链球菌感染可引起中毒性休克,并命名为链球菌中毒性休克综合征(strep-tococcal toxic shock Syndrome,STSS)。STSS的致病菌90%以上是A族-β溶血性链球菌,国内个别报道发现α-草绿色链球菌,并命名为缓症链球菌,B族-β溶血性链球菌罕见。临床上主要致病物质是链球菌产生的致热性外毒素。STSS的发病取决于细菌的毒力,侵袭力和宿主的防御能力。STSS发病机制尚未明了,目前普遍认为与链球菌性超抗原引起的免疫应答有关。STSS多发生于健康儿童,潜伏期短,起病急骤,可见于任何年龄儿童,平均发病年龄为4岁左右,男略多于女,好发季节为3—8月,也有冬季发病。约20%的患儿有类似上呼吸道感染症状,表现为发热、寒战、呕吐、腹泻、肌痛等。此外主要表现有:(1)弥漫性血管内凝血;(2)肝功损害;(3)心内膜炎;(4)坏死性筋膜炎;(5)肺内病变;(6)多脏器衰竭;(7)猩红热样皮损、脱皮。肾功能不全最常见,占80%,部分出现水、电解质及酸碱平衡紊乱。治疗上:(1)抗生素治疗;(2)对症治疗。总之,休克的抢救,重要脏器的保护,有效抗生素,尤其是抗生素的应用是治疗的关键。本患儿起病后早期即出现低血压、肾功能损害及恢复期脱皮,ASO呈进行性升高,诊断是成立的。但早期对该病认识不足,未能进行咽拭子培养。通过此病例笔者认为,对遇到类似病例应及时想到STSS的可能,早期做相关检查和培养,以便及时做出诊断和治疗。

  

日期:2013年2月27日 - 来自[2012年第10卷第10期]栏目
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