主题:验证

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韩春雨论文事件:撤稿验证科学界“自净”机制

新华社北京8月7日电特稿:韩春雨撤稿验证科学界自净机制 新华社记者黄堃 备受关注的韩春雨基因编辑论文争议事件近日有了结果,韩春雨团队在英国著名学术刊物《自然》子刊《自然·生物技术》网...即将发布

日期:2017年8月7日 - 来自[技术要闻]栏目

欧盟研究项目验证合成细胞工厂可行性

据欧委会研发创新总司网站2月2日报道,欧盟资助的METACODE研究项目验证了通过可控方式设计并生产微生物菌株的可行性,这一科学突破对于医药研发和生物科技意义重大,并有助于新学科异源生物学(xenob...即将发布

日期:2017年2月10日 - 来自[技术要闻]栏目

国际抗体验证工作组发布验证抗体特异性五大策略

 

国际抗体验证工作组(IWGAV)是全球范围内由研究方向各异的蛋白质生物学家组成的独立工作组。IWGAV 9月19日在瑞典斯德哥尔摩披露,为满足在抗体特异性、功能性和重复性的迫切需求,该工作组已于9月在《Nature Methods》在线发表了初步的战略建议。“针对建立广泛可接受的抗体验证标准和为生物医药研究提供始终如一的高质量抗体,这篇文章的发表预示迈出了重要的第一步。”瑞典斯德哥尔摩皇家工学院的微生物学教授兼IWGAV主席Dr. Mathias Uhlén表示。

尽管抗体是科学研究中最常用的一种工具,但是没有全面准确的科学架构来验证抗体在不同研究方法上的特异性。据估计,在美国和全世界使用特征不明确的抗体每年分别浪费3.5亿和8亿美元,而这样的抗体会导致实验失败或结果不可靠。IWGAV是首家为抗体生产商和使用者制定抗体验证策略的组织。作为世界领先的科技服务供应商,赛默飞世尔科技在2015年为IWGAV提供经济支持,从而引领行业标准的开发,并帮助科研人员克服抗体特异性和重复性带来的共同挑战。

IWGAV确定了五个支柱策略,以指导通过特定应用进行抗体验证的方式:一是基因策略:利用CRISPR/Cas 或RNAi等技术,将对照细胞或组织中的目标基因敲除或敲低,并检测这些对照细胞或组织中的相关信号。二是正交策略:使用非抗体依赖方法对大量样品进行定量,并检测基于抗体和非抗体定量间的相关性。三是独立抗体策略:使用2种或多种可识别目标蛋白表面不同抗原决定簇的独立抗体,并通过对比或定量分析确定特异性。四是标签蛋白的表达:为内源性目标基因添加亲和标签或荧光蛋白标签。利用抗体检测方法可对来自标签蛋白的信号进行校正。五是免疫捕获及质谱分析(MS):免疫沈淀(IP)技术可通过使用与目标蛋白特异性结合的抗体分离出目标蛋白,其与MS分析结合(IP-MS)可识别与纯化抗体直接发生相互作用的目标蛋白以及可能与目标蛋白形成复合物的蛋白。

尽管上述每一项策略都能为抗体特异性提供证据,但IWGAV建议采取多项策略来阐明抗体在不同研究应用中的特异性。发表在《Nature Methods》上的文章在抗体重复性上,还对生产商和用户提出了建议。发表在《Nature Methods》上的提议旨在为抗体验证和重复性标准提供科学基础,并鼓励建立广泛认可的抗体综合性使用指南。(刘雯)

日期:2016年9月19日 - 来自[待分类信息]栏目

重视感染性疾病血清学检测 加强性能验证及质量控制

 近日,在第十一届全国检验年会期间,卫计委临检中心王露楠教授与来自全国检验、感染领域近200位专家就“感染性疾病血清学检测的性能验证及质量控制”为主题进行了深入探讨与分享,四川大学华西医院教授王兰兰担任会议主席。

王露楠教授提出,近年来,实验室及检验行业从业人员对检测性能验证的认可逐渐提高,实验室人员应依据性能评价的结果判断,不仅仅关注呈现指标,也须了解实验室内检测系统、性能优劣所在及检测结果的报告方式等。

筛查试验和诊断试验的

区别与应用

王露楠教授表示,感染性疾病检测临床应用可分为筛查试验、诊断试验、确认试验和治疗监测四方面。筛查试验是指用于筛查的定性试验必须具有高敏感性以确保感染病原体被检出;诊断实验指用于临床某种特定疾病或状况是否存在的诊断;确认试验是指用于验证筛查试验或诊断试验结果的试验;治疗监测是指用于判定治疗效果的检测。

对于如何界定筛查试验和诊断试验,王露楠教授表示,“在做术前感染性疾病筛查时,以筛查为目的,这时要求试剂具备高灵敏度,但有可能特异性相对不很高,出现假阳性。就诊断试剂而言,因受检测人群不同,诊断试剂针对有可能感染人群,意味着感染可能性较高。因此,要树立的观念是,应着重强调试剂的用途,检测不同人群时应明确性能指标的关注点。”

性能验证的

主要指标介绍及应用

王露楠教授表示,实验室人员对设备系统的熟悉程度及用于性能验证的样本是性能验证的关键因素。性能验证的关键性能指标包含精密度、分析灵敏度、临床灵敏度、分析特异性和临床特异性。关于精密度,由于待评价方法不同,影响浓度接近临界值样本检测结果的精密度偏差来源也不相同;与定量检测相似,定性检测同样应考虑偏移(系统误差)和不精密度(随机误差)。评价定性检测试剂或系统精密度时,需采用浓度接近临界值的分析物作为检测材料。

针对分析灵敏度,王露楠教授指出,单次检测没有检测出待测物,并不意味着分析灵敏度没达到要求,单次检测出待测物也不意味着达到要求。验证检测下限通过系列稀释,发现检测限以上和检测限以下符合率存在变化,理想的分析灵敏度确认曲线是通过软件统计分析得出来的,这是分析灵敏度检测下限认证的重要方法。同时,分析灵敏度验证是确定室内质控浓度的重要依据。

关于分析特异性,王露楠教授提出,交叉反应和类风湿因子是可能影响分析特异性的两个因素,人群和流行率则是影响临床特异性的两个因素。如疾病发病率高,新感染者增加,窗口期人数增加,应选择对血清转换较敏感的方法,如抗原/抗体联合检测、核酸检测等。当疾病流行率上升时,人群中真阳性数增加,为避免假阴性结果,应选择灵敏度高的试剂。性能验证的结果是开展室内质控和制定结果报告流程的依据。

实验室检测流程简介和选择

王露楠教授指出,感染性疾病血清学检测的流程选择与确定,应根据检测目的确认。以梅毒为例,其检测流程相对较复杂。美国和欧洲指南中关于梅毒检测流程的推荐也不尽相同。根据目前实际使用情况,美国的大型实验室和欧洲的主要实验室都逐渐采取了以梅毒特异性抗体检测为初步实验,以梅毒非特异性抗体检测为补充实验的检测流程。实际操作中需根据最初性能验证结果制定符合各自实验室要求的检测流程。如以筛查为目的,建议选择灵敏度较高的试剂作为起点,当然这一过程中假阳性问题不可忽视,建议阳性样本复检。如以诊断为目,特异性则需非常好。可见,性能验证结果对检测流程的制定至关重要。

在会议讨论环节,针对发光法初检梅毒呈阴性,初检后即刻复检TPPA呈阳性,三个月后再次复检TPPA呈阴性的样本,王露楠教授表示,“免疫学检测的影响因素是多方面的,如炎性反应会对TPPA检测产生影响,应考虑静置样本后再进行检测,所以推荐TPPA作为筛查后的确认检测。”关于假阴性,王露楠教授指出,“此现象源于检测试剂在生产过程中的抗原选择及试剂的方法学,无论发光法还是ELISA,都可能存在假阴性情况,之前讲丙肝感染的复杂性,针对不同抗原检测的抗体会有不同情况,梅毒检测复杂性与丙肝类似,一些特殊的抗原产生对应抗体片断很难检出。就感染性疾病检测而言,不存在灵敏度100%的试剂,每种试剂都存有漏检可能,须尽可能使用灵敏度高的试剂。”

就梅毒检测这一问题,王兰兰教授认为:“实验室在做梅毒检测时会遇到较多问题,用ELISA方法检测,结果灰区时会带来临床纠纷,因此目前很多医院使用发光法检测梅毒。作为检验人员须了解所选择的检测方法学及试剂的性能优势所在,如临床灵敏度、分析灵敏度等。”

在本次会议上,王露楠教授对感染性疾病血清学检测的性能验证及质量控制进行了介绍,建议针对不同检测目的,将筛查试验和诊断试验区别应用,尤其对性能验证的主要指标及应用、检测流程介绍和选择等方面进行了细致翔实的阐述。各位专家积极参与会议,讨论罗氏诊断传染检测血清学标志物的优异性能,及其可为实验室医生、临床医生、传染病患者带来的诸多获益。

日期:2015年10月28日 - 来自[技术要闻]栏目

Abcam为生命科学研究者提升抗体验证标准以提高质量

2015年9月23日 - 作为一家全球领先的生命科学研究工具提供者,Abcam plc今天宣布了一项业界颇具挑战性的抗体验证项目,以满足行业对抗体更高的靶标特异性的苛刻需求。

《Nature》一篇最近的文章显示,由于有些非特异的和不可靠的抗体1存在,全球用于蛋白识别的大约50%的科研经费被白白浪费了。为了提升精准抗体的识别,Abcam通过提供空前规模的经过敲除验证的抗体,来推动行业标准的提高。公司承担高标准的验证意味着客户不再需要为这些抗体付出高昂的费用。这项举措也让那些原本自己要做敲除验证的客户大大节约了时间和费用。经过此类验证的抗体很多是重组单克隆抗体,专门解决生命科学对抗体特异性和一致性的要求。

敲除验证使用不表达特定蛋白的敲除细胞株,因此是一个真正的阴性对照2。Abcam有Horizon Discovery集团精准敲除验证技术的专有使用权限,确保抗体对靶标蛋白是高度特异的,为科研工作者提供值得信赖的数据,使他们能够放心地选择正确的产品,确保自己的实验结果准确。

Abcam的CEO Alan Hirzel强调:“我们尽最大努力提供最高质量的产品以及相关的支持数据。我们决定使用这些专有敲除细胞株意味着我们能给研究者更高水平的信心,确信他们正在使用的产品拥有最高水准的特异性。我们期望这些变化能为生命科学客户找回更多被浪费的经费,推动他们的研究工作。”

“我们现在已经在对常用的抗体使用基于敲除的验证,我们的目标是将这样的验证用于我们所有的产品。使用最新的敲除验证技术,这样大规模的验证已经成为可能。”

经过敲除验证的抗体全球各地都可以从Abcam购买。

更多信息请访问http://www.abcam.com/knockoutvalidated

日期:2015年9月24日 - 来自[技术要闻]栏目

中国埃博拉病毒检测试剂获验证 15分钟可测出

 

昨日,记者从中科院武汉病毒所获悉,在中国科学院院长基金特支项目支持下,该所新发传染病研究中心石正丽、严兵研究组,联合开发研制出具有自主知识产权的“埃博拉病毒快速检测试纸条”和“埃博拉病毒抗体ELISA检测试剂盒”,并于近期在法国里昂P4(生物安全等级4级)实验室获得验证。

实验证明,该中心所研制的埃博拉病毒快速检测试纸条和埃博拉病毒抗体ELISA检测试剂盒,均可以快速有效地检测埃博拉病毒的抗原和抗体,其中快速检测试纸条可以实现在15分钟内快速检测。

埃博拉病毒被列为生物安全等级 4级病毒(SARS病毒为三级),因其传播速度快,致病率高,且目前全球尚无获准使用的埃博拉药物和疫苗,快捷方便的诊断对于口岸等尽早发现病人、及时采取防控措施有重要意义。较之目前应用于埃博拉检测的标准PCR试剂盒,中科院武汉病毒所研制的埃博拉病毒快速检测试纸条检测速度可提高90%,灵敏度高,无需依赖任何仪器设备,检测样本为人全血、血清、或血浆,可广泛用于临床和检验检疫的现场应用。它的成功研制,可望为埃博拉病毒的预警、监测、诊断及防控提供重要的保障。

 

日期:2015年9月5日 - 来自[流行病与传染病]栏目

海洋生物疫苗进行验证性应用

日前,记者从中国工程院农业学部主办、华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室等承办的“‘海水养殖鱼类病原与病害控制’工程论坛”上获悉,水产病害使我国海水养殖病害发病率达到50%,每年造成的经济损失高达160亿元,其中鱼类病害损失85亿元。

  专家指出,病害已成为我国水产养殖业稳定和健康发展的主要瓶颈,防控面临着抗药病原大量产生和蔓延、养殖管理模式冲突、盲目用药普遍等3个困局,传统使用化学合成药物或抗生素类药物来防控病害的方法,危害人类的健康和水体生态环境,必须构筑节能减排、绿色环保、优质高效的鱼类工业化养殖模式。免疫防治是水产养殖可持续发展的最佳策略,目前我国已有5种海洋生物疫苗处于田间试验或进行验证性应用。

日期:2013年10月22日 - 来自[生物医药]栏目

出口食企要关注美国验证新规定

近日,美国食品和药品管理局基于《食品安全现代法》发布一项具体实施条例,将针对进口食品实施"外国供应商验证"程序。

据江苏张家港检验检疫局的食品法规专家介绍,美国这项验证程序要求美国每个进口商开展针对外国供应商的"风险验证"活动,确保输入美国的食品符合特定的生产工艺要求。新规除符合条件的果汁产品、酒精饮料、符合HACCP要求的海产品、低酸罐头食品等,其他诸如粮食制品、肉制品、调味品、糖果、罐头食品、糖果等各类食品几乎都在新法规的监控范围内。



日期:2013年8月30日 - 来自[安全快报]栏目
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