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金莲花药材高效液相色谱法指纹谱分析

来源:中国论文下载中心 作者:王巧,许磊,冯超,杨维,李德强,张维,张兰桐 2010-10-2
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摘要: 金莲花为毛茛科植物金莲花Trollius chinensis Bunge。现代药理研究表明,金莲花具有抗菌、抗病毒等活性,已有其多种单味和复方制剂用于临床呼吸道感染和肠道感染[1]。金莲花主要化学成分有黄酮、有机酸、生物碱等[2,3],目前其质量控制方法多以测定其总黄酮或几种化学成分的含量为主[4,5]。HPLC指纹图谱技术具有......


    金莲花为毛茛科植物金莲花Trollius chinensis Bunge.的干燥花,始载于《本草纲目拾遗》,谓其“味苦,性寒,无毒”,可“治口疮,喉肿,浮热牙宣,耳疼,目痛”,具有“明目,解岚瘴”的功效。现代药理研究表明,金莲花具有抗菌、抗病毒等活性,已有其多种单味和复方制剂用于临床呼吸道感染和肠道感染[1]。金莲花主要化学成分有黄酮、有机酸、生物碱等[2,3],目前其质量控制方法多以测定其总黄酮或几种化学成分的含量为主[4,5]。HPLC指纹图谱技术具有整体、宏观、模糊分析的特点,适用于药效物质基础未得到有效阐明的中药材的质量评价。本研究建立金莲花药材的HPLC指纹图谱分析方法,为科学评价其质量提供新依据。

  1  仪器与试药

    Agilent-1200高效液相色谱仪(在线脱气机,四元泵,自动进样器, PDA检测器);Agilent chemoffice工作站;SCQ-200超声波清洗器(100 W,25 kHz,上海声谱超声波设备厂),SZ-93 自动双重纯水蒸馏器(上海亚荣生化仪器厂)。乙腈为色谱纯(美国迪马公司),水为二次重蒸水,其他试剂均为分析纯。荭草素-2''-O-β-L-半乳糖苷和荭草苷对照品均由河北医科大学药学院分离制备,归一化法测定含量大于95.0%。共收集11批金莲花药材。其产地见表1。所有药材均经河北医科大学刘振通高级技师鉴定。

  2  方法与结果

  2.1  色谱条件色谱柱为Zorbax SB-C18柱(150 mm×4.6 mm,5  μm)(Agilent公司);流动相乙腈(A)和0.05%磷酸溶液(B)梯度洗脱:0~30 min,3%~28% A,30~50min,28%~50%A,50~55 min,50%~3%A,55~65 min,3%A,记录50 min色谱图;检测波长200 nm,柱温30℃,进样量20 μl。表1  金莲花样品来源(略)

  2.2  溶液的制备

  2.2.1  供试品溶液金莲花药材经粉碎,过40目筛。取金莲花药材粉末约0.15 g,精密称定,置50 ml锥形瓶中,加50%甲醇25.00 ml,称重,超声提取30 min,取出,放冷,用50%甲醇补足减失的重量,摇匀,微孔滤膜(0.45 μm)滤过,即得供试品溶液。

  2.2.2  对照品溶液分别称取荭草素-2''-O-β-L-半乳糖苷和荭草苷对照品适量,用甲醇溶解,分别制成一定浓度的对照品溶液,备用。

  2.3  方法学考察

  2.3.1  精密度实验取金莲花药材供试品溶液,连续进样6次,各共有峰的相对保留时间RSD均小于0.08%,相对峰面积RSD均小于1.70%,表明方法精密度良好。

  2.3.2  重复性实验取同一批金莲花药材6份,制备供试品溶液,各共有峰的相对保留时间RSD均小于0.12%,相对峰面积比值RSD均小于2.72%,表明方法重复性良好。

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