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牡丹皮中有效成分丹皮酚的毛细管电泳快速检测新方法

来源:药物分析网 作者:佚名 2006-12-16
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摘要: 牡丹皮( cortex m ou tan)是毛莨科植物牡丹( Paeonia suffruticosa Andr。丹皮酚(paeonol)为牡丹皮的重要有效成分之一(分子结构见图1) , 有抗菌消炎、降压止血的作用, 其含量测定对牡丹皮及其制剂的质量控制和药理研究具有重要的意义。文献采用毛细管电泳(CE)光学检测的方法测定了丹皮酚, 但分离需时较长, 方法检出限较高......


牡丹皮( cortex m ou tan)是毛莨科植物牡丹( Paeonia suffruticosa Andr. )的干燥根皮, 具有清热凉血、活血化瘀等功效。丹皮酚(paeonol)为牡丹皮的重要有效成分之一(分子结构见图1) , 有抗菌消炎、降压止血的作用, 其含量测定对牡丹皮及其制剂的质量控制和药理研究具有重要的意义。药典规定丹皮酚的测定方法为分光光度法, 文献报道较多的测定丹皮酚的其它方法有光谱法、化学发光法、高效液相色谱法和气相色谱法等, 后两者仪器设备昂贵、试剂成本高、分析时间较长、所需样品量较多。文献采用毛细管电泳(CE)光学检测的方法测定了丹皮酚, 但分离需时较长, 方法检出限较高, 分析速度和检测灵敏度还有待提高。
    在弱碱性条件下, 丹皮酚易于离子化, 本文首次采用毛细管电泳-高频电导法成功分离检测了丹皮酚, 与文献采用的CE光学方法相比, 本方法简便、快速、灵敏; 在优化条件下, 4 min内即可实现对丹皮酚的分析测定, 检出限为013μg/mL, 检测了牡丹皮中的丹皮酚含量, 结果令人满意。

    实验部分
    仪器与试剂
    高压电源(自制) , 高频电导检测器(自制) 。石英毛细管( 150μm-i.d.) , 毛细管总长65.0cm, 有效长度55.0 cm, 河北永年光导纤维厂生产。数据工作站, 中山大学化学与化学工程学院赖w
提供。信号采集使用台湾EVOC出品的PCL-711B型A /D卡; 数据记录与处理在普通P3微机上完成。
    丹皮酚对照品(中国药品生物制品检定所) ; 三(羟甲基)氨基酸甲烷( Tris, GR香港分装) ; 其余试剂均为国产, AR; 所用水为二次去离子重蒸水。牡丹皮药材购自广州采芝林药店(产地: 四川) 。

    对照品溶液的制备和样品的提取
    称取丹皮酚0.015 0 g, 加背景电解质溶液( 3.0 mmol/L 三乙胺- 1.0 mmol/L H3BO3 - 10%CH3OH)溶解并定容于10.0 mL量瓶中, 得质量浓度为1.50 mg/mL的对照品溶液。
    将牡丹皮药材粉碎, 过(150 ±6.6) μm筛。称取牡丹皮药材粉末0.200 0 g, 置于具塞锥形瓶中,加入上述背景电解质溶液5.0 mL, 超声提取30 min, 振摇后静置, 过滤。重复提取1次, 合并两次提取的滤液, 定容于10.0 mL容量瓶中, 得待测样品溶液。

    实验方法
    毛细管柱在使用前, 先用0.1 mol/L NaOH、H2O、运行背景电解质溶液分别洗30、15、15 min。采用重力虹吸方式进样, 位差25.0 cm进样8.0 s。分离电压为2010 kV。高频电导检测器的输出信号经数据工作站采集到微机中进行实时数据处理、图形显示和数据文件存储。实验在恒温(25 ℃) 、恒湿(相对湿度60% )的条件下进行。

    结 论
    弱碱性背景电解质溶液有利于提取牡丹皮中的丹皮酚。在弱碱性的H3BO3 - 三乙胺背景电解质体系中可实现牡丹皮中的丹皮酚的毛细管电泳分离和高频电导检测。本研究中所用的高频电导检测器,操作极为简便, 只需将毛细管穿过检测器, 检测电极不与溶液接触, 不存在电极中毒的问题; 用毛细管电泳- 高频电导检测法测定牡丹皮中的有效成分丹皮酚, 样品前处理简单易行, 方法简便、快速、灵敏、可靠、廉价, 结果满意, 是一种较好的检测方法。

作者:翟海云, 徐健君, 陈缵光, 卢少兰, 蔡沛祥, 莫金垣


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