当前位置:首页 > 药品天地 > 专业药学 > 中国药典 > 2000版二部附录 > 玻璃酸酶测定法

玻璃酸酶测定法

来源:中国药典2000年版二部 作者:自动采集 2005-4-6

摘要: 标题玻璃酸酶测定法附录序号附录Ⅻ内容全文C。 玻璃酸酶测定法试剂(1) 醋酸-醋酸钾缓冲液取醋酸钾14g与冰醋酸20。5ml,加水使成1000ml。2g,加水使成1000ml。...


标题 玻璃酸酶测定法
附录序号 附录Ⅻ
内容全文   C. 玻璃酸酶测定法
  试剂
  (1) 醋酸-醋酸钾缓冲液
  取醋酸钾14g与冰醋酸20.5ml,加水使成1000ml。
  (2) 磷酸盐缓冲液
  取磷酸二氢钠2.5g、无水磷酸氢二钠1.0g与氯化钠8.2g,加水使成1000ml。
  (3) 水解明胶
  取明胶50g,加水1000ml,在121℃加热90分钟,然后冷冻干燥。
  (4) 水解明胶稀释液
  取磷酸盐缓冲液与水各250ml,加水解明胶330mg,摇匀,在0~4℃保存。如溶液不发生浑浊,可继续使用。
  (5) 血清贮备液
  取新鲜牛血清或冻干牛血清(先用水溶解并稀释至标示量体积)1份,加醋酸-醋酸钾缓冲液9份稀释,再以4mol/L盐酸溶液调节pH值至3.1,放置18~24小时后再用。在0~4℃保存,可应用30日。
  (6) 血清溶液
  血清贮备液中血清总固体(取牛血清适量,置装有洁净砂粒并在105℃干燥至恒重的坩埚中,置水浴上蒸干后,再在105℃干燥至恒重)在8%左右者,取1份,用醋酸-醋酸钾缓冲液3份稀释;血清总固体在5%左右者,取1份,用醋酸-醋酸钾缓冲液2份稀释;临用时配制。
  (7) 玻璃酸钾贮备液
  取预先经五氧化二磷减压干燥48小时的玻璃酸钾,加水制成每1ml中含0.5mg的溶液。在0℃以下保存,可应用30日。
  (8) 玻璃酸钾溶液 取玻璃酸钾贮备液1份,用磷酸盐缓冲液1份稀释。临用时配制。
  标准品溶液的制备
  取玻璃酸酶标准品适量,精密称定,加冷的水解明胶稀释液制成每1ml中含1.5单位的溶液。临用时配制。
  供试品溶液的制备
  按估计单位精密称取供试品适量,加冷的水解明胶稀释液制成每1ml中含1.5单位的溶液。临用时配制。
  标准曲线的制备
  取大小相同的试管12支,按顺序加入标准品溶液0.00、0.10、0.20、0.30、0.40与0.50ml,每份2支;再依次相应加入水解明胶稀释液0.50、 0.40、0.30、0.20、0.10与0.00ml,每隔30秒钟顺序加入玻璃酸钾溶液0.50ml,使每一管的总体积为1.00ml,摇匀,置37±0.5水浴中;每管准确保温30分钟后,每间隔30秒钟顺序取出,立即顺序加入血清溶液4.0ml, 摇匀,在室温放置30分钟,摇匀,在640nm的波长处测定吸收度;同时以磷酸盐缓冲液0.50ml代替玻璃酸钾溶液,加水解明胶稀释液0.50ml,摇匀,按上述方法自 “置37±0.5℃的水浴中”起同样操作,作为空白。以吸收度为纵座标,标准品溶液的单位数为横座标绘制标准曲线。
  测定法
  取大小相同的试管6支,依次加供试品溶液0.20、0.30与0.40ml,每份2支;再依次相应加入水解明胶稀释液0.30、0.20与0.10ml,照标准曲线的制备项下,自“每隔30秒钟顺序加入玻璃酸钾溶液0.50ml”起,依法测定,自标准曲线上查得单位数后,分别除以供试品的重量(mg), 算出6份供试品的平均数,即为玻璃酸酶的效价单位。

医学百科App—医学基础知识学习工具


页:
返回顶部】【打印本文】【放入收藏夹】【收藏到新浪】【发布评论



察看关于《玻璃酸酶测定法》的讨论


关闭

网站地图 | RSS订阅 | 图文 | 版权说明 | 友情链接
Copyright © 2008 39kf.com All rights reserved. 医源世界 版权所有 苏ICP备12067730号-1
医源世界所刊载之内容一般仅用于教育目的。您从医源世界获取的信息不得直接用于诊断、治疗疾病或应对您的健康问题。如果您怀疑自己有健康问题,请直接咨询您的保健医生。医源世界、作者、编辑都将不负任何责任和义务。
本站内容来源于网络,转载仅为传播信息促进医药行业发展,如果我们的行为侵犯了您的权益,请及时与我们联系我们将在收到通知后妥善处理该部分内容
联系Email: