高效液相色谱法(HPLC)在体内药物分析中的应用

    HPLC由于测定迅速准确，流动相选择范围广，灵敏度高(10-12 g／mL以上)，填充柱种类多，且可供选择的检测器也多。所以是实验室研究中很好的体内分析方法。在国内外都很受重视．数药物都有紫外吸收，所以最常用的检测器是紫外检测器。多数药物及内源性物质极性均较大，利用其极性差，可以采用RP-HPLC色谱柱，可获得良好分离效果。
    张华年等用IIPLC法检测婴儿痉挛患儿口服硝西泮(NZP)后血清中药物浓度，结果NZP血药浓度在200～1200μg／L范围内线性关系良好，最低检测浓度为5μg／L，绝对回收率达94％以上，日内和日间RSD分别小于2.8％和3.7％。该法简便、快速、准确，适用于血清中NZP监测。并得出NZP在口服剂量为O.5mg／d(bid)时，患儿的稳态血药浓度体差异大，在102.8～361.8μg／L之间，因此最好采用个体化给药。
    Zheng等利用Chirobiotic V手性柱(4.6 mm×150 mm，5μm)，在HPLC条件下，于240帆处检测了西泰普兰(CIT)消旋体及R-和S-CIT的去甲基和双去甲基代谢物(DM-CI')，为了建立药动学及药效学关系以确定抗抑郁活性物，系统中设置保护柱Hypersil SI，流动相为甲醇-醋酸-三乙胺(400：0.2：0.15)，CIT及两种代谢物在无外物干扰下达到基线分离，通过实验也发现CIT对映体与DM-CIT及R-CIT与其主要代谢物之间显著相关。该法可能有助于建立明确的CIT血浆浓度(或DM-CIT)与临床反应关系。
    刑俊家等采用高效液相色谱法，以非那西丁为内标物，经ODS（15cm×4mm，10μm）柱，以甲醇-水（30：70）为流动相，在278nm处测定了人血中及尿中氯霉素的含量。测得平均回收率分别为100.6%和99.5%。
    张华年等用固相萃取高效液相色谱法检测生物样本中甲氨蝶呤。仪器：HP1100系列高效液相色谱仪，色谱柱为ODS Hypesil(5μL，250mm×4.6mm)。流动相为甲醇-乙睛-7％磷酸二氢钠和1％枸橼酸缓冲液(2：7：91)，柱温：25℃ ，检测波长：313nm。结果按3倍噪音计算，血清和脑脊液中MTX的最低检测浓度分别为10ng／mL和5ng／mL。本方法使MTX与代谢产物及血清中内源性杂质达到基线分离，重现性好，又简便、快速、灵敏度高、特异性强。