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细胞消化胰酶的配制

来源:网络 作者:佚名 2008-2-3
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摘要: 适用于,无师兄、师姐、非细心、单独开展细胞培养的实验者对一般细胞 0。4785gPO4HNa2·。9gPO4HNa2 ,0。2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水)2 称胰酶0。...


适用于,无师兄、师姐、非细心、单独开展细胞培养的实验者

对一般细胞 0.25% 胰酶(胰蛋白酶,Trypsin)
配方:100ml PBS,0.25g胰酶
步骤:1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O
/2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水)
2 称胰酶0.25g
3 加入PBS中,低速搅拌 〈4h冰浴中,或者4℃过夜
低速搅拌0.5h冰浴中
4 调PH7.4
5 仍在冰浴中
6 过滤,分装,-20℃保存,4℃短期内用完
tip:低速很重要,机械搅拌对酶是一种冲击,如果起沫,
酶就变性了。低温,防止酶失活
对难消化的细胞:在上述配方中,加入0.02g的EDTA(0.02%)
tip:因为EDTA可以络合Ca2+,增加消化效力
 


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