构建可诱导性真核表达载体为观察肿瘤奠定基础

日前，第四军医大学西京医院普通外科的研究人员采用金属硫蛋白－Ⅱ型（MT－Ⅱ）启动子，并以适量的Zn2＋诱导启动下游基因绿色荧光蛋白（GFP）大量转录，成功构建了以GFP作为筛选标记并可稳定转染的可诱导性真核表达载体。

如何简便、快速、经济地了解和提高目的基因的转染效率，并筛选出转基因细胞，是基因治疗研究中的重要课题，而选择理想的报告基因和标记基因是解决此问题的关键。源于维多利亚水母的GFP是新近发现的一种报告基因。GFP由238氨基酸组成，它们在各种真核细胞中都可作为定位各种蛋白质的标记物。

西京医院普通外科的研究人员将GFP克隆到可诱导性真核表达载体pMD－neo上，从而构建成携带绿色荧光蛋白的可诱导性真核表达载体pMD－GFP。随后，他们又采用脂质体转染法，将GFP基因转入HCC－9204细胞中。通过荧光显微镜观察他们发现，在被转入GFP基因的HCC－9204／GFP细胞中，荧光均匀地分布于整个细胞--样就可以非常便捷地筛选出转染基因细胞。

据研究人员介绍，携带绿色荧光蛋白的可诱导性真核表达载体的构建，为进一步观察人体内肿瘤的生长和转移打下了基础。

《中国医药报》