脂多糖对间充质干细胞Toll样受体4基因的表达水平及活性的影响

2008年07月17日 《中华血液学杂志》-2007年28卷12期 -828-831页 医学空间（MEDcyber.com）7月17日消息，该项研究目的是探讨脂多糖（LPS）对骨髓间充质干细胞（MSC）Toll样受体4（TLR-4）基因的表达及其功能的影响。方法采用贴壁培养和密度梯度离心法从大鼠骨髓分离MSC，通过细胞形态、成骨分化潜能及流式细胞术检测表型以鉴定其纯度；半定量RT-PCR和流式细胞术分别检测MSC在不同浓度（1、10、100μg／ml）LPS存在条件下培养24h的TLR-4mRNA相对表达量和共刺激分子（CD80、CD86、MHC-Ⅱ）的表达水平；ELISA法定量检测TNF-α的分泌水平。结果骨髓MSC低表达TLR-4mRNA（相对表达量0．61±0．10），同时表达CD80[（9．56±0．69）％]、CD86[（22．03±2．03）％]、MHC-Ⅱ[（2．51±0．97）％]，少量分泌TNF-α[（4．97±2．98）pg／ml]。MSC经LPS处理后，其TLR-4mRNA、共刺激分子表达和TNF-α分泌水平均升高，其中10μg／ml LPS培养组升高显著，TLR-4mRNA相对表达水平为1．55±0．02；CD80、CD86、MHC-Ⅱ阳性细胞率分别为（41．70±2．92）％、（59．72±2．00）％、（24．56±2．19）％；TNF-α分泌水平为（213．12±69．08）pg／ml，与对照组比较，P值均〈0．01。100μg／ml LPS处理组与10μg／ml LPS处理组相比，各项检测指标均降低，但MHC-Ⅱ和TNF-α的降低水平无统计学意义（P〉0．05）。由此得出结论骨髓MSC低表达TLR-4，体外LPS可促进骨髓MSCTLR-4的表达，且与浓度相关。伴随TLR-4表达水平的升高，CD80、CD86、MHC-Ⅱ表达水平及TNF-α水平同时升高。