三种细胞因子组合诱导小鼠骨髓单个核细胞分化为肝细胞

2006年12月25日 中华器官移植杂志 2006 Vol.27 No.6 P.330-333 13 （绍兴）为了探索小鼠骨髓来源的单核细胞向肝细胞分化的诱导条件。研究者通过密度梯度离心的方法获得小鼠骨髓来源的单个核细胞；在含有100 g/L新生牛血清的IMDM培养液中添加细胞因子HGF 20 ng/ml、FGF-4 10ng/ml和OSM10ng/ml，诱导骨髓来源的单个核细胞向肝细胞分化。结果小鼠骨髓单个核细胞在3种细胞因子的诱导下，随着时间的延长，体积逐渐增大、形态上向上皮样细胞转变，胞浆丰富，出现双核或多核细胞；半定量RT-PCR的结果显示，甲胎蛋白(AFP)和细胞角蛋白19(CK19)的表达量在诱导初期首先增加，在诱导后期逐渐减少，而白蛋白(ALB)、细胞角蛋白18(CK18)以及酪胺酸胺基转移酶(TAT)的表达与诱导时间呈线性关系；免疫荧光检测诱导3周后的细胞，AFP、CK19、CK18和ALB均为阳性表达；诱导3周的细胞PAS糖原合成反应呈阳性，说明已经具备糖元合成和储存一肝细胞的特征性功能。可见培养液中添加3种细胞因子(HGF、FGF-4和OSM)组合可以诱导小鼠单个核细胞向肝细胞分化。