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共轭亚油酸对2型糖尿病小鼠降糖作用的研究

来源:INTERNET 作者:姜伟 石红旗 刘发义 韩山国 2005-7-1
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摘要: 【摘要】 目的 研究共轭亚油酸对2型糖尿病小鼠血糖的影响。方法 通过对饲喂高糖高脂饲料建立起来的肥胖型小鼠注射链脲佐菌素,建 立2型糖尿病小鼠模型,实验组继之喂食正常饲料的同时喂食共轭亚油酸,对照组则在喂食正常饲料的同时喂食花生油,测定其摄食量、体重 、血糖、糖化血红蛋白(HbAlc)指标。结果 共轭亚油酸能......


  【摘要】 目的 研究共轭亚油酸对2型糖尿病小鼠血糖的影响。方法 通过对饲喂高糖高脂饲料建立起来的肥胖型小鼠注射链脲佐菌素,建 立2型糖尿病小鼠模型,实验组继之喂食正常饲料的同时喂食共轭亚油酸,对照组则在喂食正常饲料的同时喂食花生油,测定其摄食量、体重 、血糖、糖化血红蛋白(HbAlc)指标。结果 共轭亚油酸能明显降低2型糖尿病小鼠的摄食量、体重、糖化血红蛋白及血糖值(P<0.01),而 对正常小鼠影响不显著。结论 共轭亚油酸在治疗糖尿病方面具有一定的应用价值。

  Effects of the conjugated linoleic acid on mice with type2diabetes mellitus

  Jiang Wei,Shi Hongqi,Liu Fayi,et al.

  First Institute of Oceanography,SOA,Qingdao266061.

  【Abstract】 Objective The effects of the conjugated linoleic acid on mice with type2diabetes mellitus were  studied.Methods The fat mice model was built up by feeding a high fat and sugar diet,and then the fat mice were injected  with streptozotocin to induce type2diabetes mellitus.The treatment groups were fed on the normal diet with conjugated  linoleic acid,and the control groups were fed the normal diets with peanut oil.Conclusion Then we test the food intake, bodyweight,blood glucose and HbAlc.The results indicated that conjugated linoleic acid has a signifiˉcant effects on  reducing food intake,body weight,HbAlc and blood glucose of the mice with type2diabetes,but no effect on control  groups.These results suggest that conjugated linoleic acid maybe has therapeutic effects on type2diˉabetes mellitus.

  Key words conjugated linoleic acid mice type2diabetes mellitus HbAlc  

  共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA)是人体必需脂肪酸-亚油酸的几何异构体和位置异构体的总称。1978年Pariza [1]  等人在 研究烤牛肉中的诱变剂时,发现共轭亚油酸具有抗癌特性。此后许多学者对共轭亚油酸的生理功能进行研究,大量的实验结果表明共轭亚油酸是一种很强的抗癌物质,并具有抗动脉粥样硬化,抗过敏,促进生长,降低身体脂肪并增加瘦肉,调节免疫等作用 [2]  。CLA对实验动 物的血糖也有降低的作用 [3]  ,目前实验资料比较少。本文以2型糖尿病小鼠为模型,研究共轭亚油酸对2型糖尿病小鼠的影响,探究其降糖功能,为其在预防和治疗糖尿病方面的应用提供基础资料。

  1 材料与方法

  1.1 样品 实验用共轭亚油酸(其中CLA总含量为86.61%)由青岛澳海生物有限公司提供,用花生油配制浓度为25%。

  1.2 试剂 链脲佐菌素(Sigma公司产品);脂肪(市售猪油炼制);胆固醇(购自上海新兴化工试剂研究所);脱氧胆酸钠(中国医药集团 上海化学试剂公司进口分装);HbAlc检测试剂盒(购自南京建成生物工程研究所)。

  1.3 实验动物 昆明种小鼠100只,体重18~22g,雄性,由潍坊医学院实验动物中心提供。

  1.4 仪器 美国强生稳态血糖仪。
   
  1.5 实验方法

  1.5.1 高脂高糖饲料的配制 脂肪20%、胆固醇0.5%、脱氧胆酸钠0.2%、白砂糖10%,其余为标准小鼠饲料。塑料袋分装,4℃保存,每2周配制1次。

  1.5.2 样品和试剂的配制 共轭亚油酸样品:取共轭亚油酸和花生油按1:4的比例混合,在4℃保存备用。链脲佐菌素:用pH4.5,0.05mol/L的柠檬酸配制成180mg/kg的溶液。

  1.5.3 2型糖尿病小鼠模型的建立 将100只小鼠随机分为2组,分别喂基础饲料和高脂高糖饲料,3周后给高脂高糖组小鼠腹腔注射180mg/kg链脲佐菌素的柠檬酸溶液 [4]  ,再继续饲喂3周,并在0、1、2、3周后从高脂高糖组小鼠尾部远端取血,测定血糖。从中选取血糖达到糖尿病级数并具有相似血糖值的小鼠,作为高血糖模型鼠。

  1.5.4 检测指标的测定 (1)血糖测定小鼠过夜禁食,眼后内眦静脉取血,肝素抗凝,用血糖仪进行血糖测定。(2)HbAlc的测定小鼠断头取血,肝素抗凝,按试剂盒说明书所示方法测定HbAlc。

  2 结果

  2.1 CLA对小鼠摄食量及体重的影响 CLA对正常小鼠和高血糖小鼠的摄食量的影响如图1所示。图中可见,同为高血糖小鼠,饲喂CLA的小鼠摄食量明显低于不喂CLA的模型对照组(P<0.01);同样,对正常小鼠,饲喂CLA组摄食量也明显低于相应的正常对照组(P<0.01)。CLA对实验小鼠体重的影响见表1。实验此期间,各组小鼠的体重均有所增加,但喂食CLA的小鼠体重增加比相应的对照组增加缓慢(P<0.05),但CLA对糖尿病小鼠体 重的影响比正常小鼠更显著(P<0.01)。

  表1 CLA对实验小鼠体重的影响 (略) 注:与正常CLA组相比, △ P<0.01;与相对应的对照组相比, ˇ P<0.05, ˇˇ P<0.05

  2.2 CLA对小鼠血糖的影响 实验期间各组小鼠的血糖测定值。数据表明,对2型糖尿病小鼠,组内相比,喂食CLA的小鼠实验前后血糖值差异无显著性(P>0.05),而喂食花生油组实验后的血糖值明显高于实验前(P<0.01),组间相比,实验后模型CLA组小鼠血糖值显著低于模型对照组(P<0.01)。说明2型糖尿病小鼠继续摄入高脂饲料病情会加重,而CLA可以防止其病情加重。对正常小鼠,实验组和对照组血糖均有显著升高(P<0.01),但两组末期血糖值差异无显著性,说明在本实验的情况下CLA并不能防止摄入脂肪过多的正常小鼠血糖上升。

  表3 CLA对实验小鼠血糖的影响    注:与各组初始浓度比较, △ P<0.01, △△ P<0.01, △△△ P<0.01, △△△△ P>0.01;与相对应的对照组比较, ˇ P>0.01, ˇˇ P<0.01

  2.3 CLA对小鼠HbAlc的影响 CLA对HbAlc的影响见图2。模型对照组与正常对照组相比HbAlc明显升高(P<0.01),而模型CLA组与模型对照组相比HbAlc显著降低(P<0.01),正常CLA组与正常对照组小鼠HbAlc比较却差异无显著性(P>0.05)。由此说明CLA能降低2型糖尿病小鼠的HbAlc,而对正常小鼠无明显作用。

  3 讨论

  2型糖尿病又称非胰岛素依赖型糖尿病(non-Insulin dependent diabetes mellitus,NIDDM),其基础胰岛素分泌正常或提高,但β-细胞对葡萄糖的刺激反应减弱。在各种环境因素中,肥胖是非胰岛素依赖型糖尿病的重要诱发因素之一,肥胖者的外周组织靶细胞胰岛素受体数量减少,与胰岛素的亲和力降低,并可存在受体后缺陷,因而对胰岛素的敏感性降低,是导致高血糖的一个重要因素 [5]  。高脂高糖饮食可诱发小鼠产生高胰岛素血症和胰岛素抵抗,再注射低剂量的链脲佐菌素,可导致胰腺代偿性分泌胰岛素障碍,最后诱发高血糖症 [6]  。本实验中先给小鼠饲喂高脂高糖饲 料,建立肥胖小鼠模型,再给其注射链脲佐菌素,成功地建立了糖尿病小鼠模型。

   本实验证明CLA不仅能使2型糖尿病小鼠的血糖降低,同时使其摄食量明显降低。糖尿病的症状之一是吃的多,降低摄食量,也可能有助于糖尿病的治疗。

   传统上糖尿病的诊断和治疗都是以空腹血糖为参考指标,但血糖测定只能反映被测样本当时的血糖水平,与被测样本的身体状况、用药情况和抽血时间都有关系,波动性较大,不能反应出被测样本长时间范围内的血糖情况。随着对糖尿病研究的深入,糖化血红蛋白正日益受到高度重视 [7]  。血液中的糖化血红蛋白比例取决于血糖浓度、血糖与血红蛋白的接触时间及红细胞的存活时间,血糖浓度越高,接触时间越长,HbAlc的比例就越大。由于红细胞的平均寿命为120天左右,在红细胞死亡前,其中的HbAlc含量也可保持相对稳定,因此HbAlc的水平可反映近1~2个月内血糖平均水平。

  总之,实验证明CLA既能降低血糖,又能使HbAlc含量明显降低,因此CLA在糖尿病治疗方面有一定的应用价值,而且CLA本身还有调节血脂、降低血压等作用,因此,对于糖尿病引起的高血压高血脂等并发症的治疗也有一定的辅助作用。(本文图片见封三)

    参考文献

    1 Ha YL,Grimm NK,Pariza MW.Anticarcinogens from Fried Ground Beef:Heat-Altered Derivatives of lineoleic Acid.Carcinogenesis,1987,8:1881.

    2 Parodi PW.Conjugated linoleic-Acid and other Anticarcinogenic Aˉgents of Bovine-Milk Fat.JDairy Sel,1999,82(6):1339.

    3 杨幼琪.两种化合物抗小鼠2型糖尿病模型的研究.华西药学杂志,2002,17(3):180.

    4 J W Ryder,C P Portocattero.Isomer-Specific Antidiabetic Properties of Conjugated Linoleic Acid.Diabetes,2001,50(5):1149.

    5 郑建仙.功能性食品第3卷,北京:中国轻工业出版社,1999,473.

    6 郭啸华.实验性2型糖尿病大鼠模型的建立.肾脏病与透析肾移植杂志,2000,9(4):351.

    7 王笠,李琳,王达,等.糖化血红蛋白的检测和临床应用.上海医学检验杂志,2003,8(2):119-121.

   作者单位:1266061山东青岛国家海洋局第一海洋研究所
               2266727山东省平度市惠康大药房


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