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不同产地和贮存期对车前子中桃叶珊瑚苷含量影响的研究 (基金项目)

来源:INTERNET 作者:刘 华 刘贤旺 张寿文 2005-6-27

摘要: 39960082) 【摘要】 目的 比较江西几种不同产地和贮存期的车前子中所含桃叶珊瑚苷的情况,确定车前子的质量控制标准。方法 采用高效液相色谱法测定车前子中桃叶珊瑚苷的含量。结果 存贮期的长短,对桃叶珊瑚苷的含量影响较大。车前子以江西修水县所产为最佳,存贮期为1年的车前子中桃叶珊瑚苷平均含量为0。...


  基金项目:国家自然科学基金资助课题(No.39960082)

【摘要】 目的 比较江西几种不同产地和贮存期的车前子中所含桃叶珊瑚苷的情况,确定车前子的质量控制标准。方法 采用高效液相色谱法测定车前子中桃叶珊瑚苷的含量。结果 存贮期的长短,对桃叶珊瑚苷的含量影响较大。车前子以江西修水县所产为最佳,存贮期为1年的车前子中桃叶珊瑚苷平均含量为0.4mg/g左右。结论 本法简便、灵敏、重现性好,为制定车前子的药材质量控制标准奠定了基础。

A study on determination of aucubin contents in plantago seeds

of different producing areas and stockpike times

Liu Hua,Liu Xianwang,Zhang Shouwen.

Jiangxi College of Traditional Chinese Medicine,Nanchang330006.

【Abstract】 Objective Compare aucubin contents in plantago seeds of different producing areas and stockpike times of Jiangxi in order to establish a method for the determination of aucubin contents in plantago seeds.Methods HPLC was used.Results The length of stockpile times affects aucubin contents in Plantago seeds.The plantago seeds of Xiushui,Jiangxi is the best one.Conclusion The method is simple,sensitive and has good repeatability.It can be used for quality control in plantago seeds and its production.

Key words plantago seeds aucubin HPLC content determination

车前子为常用中药,始载于《神农本草经》,列为上品,具有清热利尿、渗湿通淋、明目祛痰的功效。《中国药典》(2000版)一部仅有车前子的质控部分包括性状、粉末鉴别、试管反应、酸不溶性、灰分和膨胀度的检查,还没有药效成分含量测定项目。桃叶珊瑚苷(aucubin)为车前子的主要有效成分,药理研究表明有降压、护肝、抗炎解痉的作用。本文采用高效液相色谱法对江西不同产地和不同存贮期的车前子中所含桃叶珊瑚苷进行了含量测定,为车前子药材的质量标准的建立提供参考。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Agilent1100型高效液相色谱仪;H66MC超声清洗机(无锡超声电子设备厂);

1.2 试剂 桃叶珊瑚苷对照由Sigma-Aldrich公司(Switzerland)提供;HPLC用试剂为色谱纯(山东禹王实业有限公司生产);提取分离用试剂均为分析纯;熏蒸水(自制)。

2 材料与方法

2.1 材料 车前子:(1)修水渣津试验田(栽培品2000、7);(2)修水渣津试验田(栽培品2001、6);(3)修水渣津试验田(栽培品2002、6);(4)江西中医学院苗圃(栽培品2002、6);(5)吉安永和镇白洲村(栽培品2002、6)。以上药材经江西中医学院姚振生教授鉴定,基源为车前(Plantago asiatica L)。

2.2 实验方法

2.2.1 色谱条件 Agilent1100型高效液相色谱仪;HyperˉsilC 8 柱(4.6mm i.d.×200mm,5μm);紫外检测波长: 206nm;流动相:乙腈—水(2:98,v/v);柱温:25℃;流速:1ml/min,进样10μl,保留时间约为7.3min;理论塔板数以桃叶珊瑚苷计算不低于2400,分离度不低于2.8,对称因子为1.10。

2.2.2 标准曲线 精密称取桃叶珊瑚苷对照品5.0mg置于50ml容量瓶中,加适当流动相溶解后配成桃叶珊瑚苷标准贮备液(100μg/ml)。分别精密吸取1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml进行稀释至10ml。再精密量取上述溶液10μl进样,按上述色谱条件测定,以峰面积为纵坐标,桃叶珊瑚苷的进样量为横坐标,绘制成标准曲线,得回归方程Y=619.50X-1.242,γ=0.9999,结果显示桃叶珊瑚苷在0.1007μg~0.6042μg间线性关系良好。

2.2.3 样品测定方法 将干燥的车前子粉碎至过四号筛,精密称取车前子粉0.5g,置于磨口锥形瓶中,加入石油醚20ml,应用超声脱脂1h,过滤后回收石油醚。待脱脂完全的车前子粉末吹干后,精密加入甲醇10ml,静置12h,称重。置超声清洗机中提取,1.5h,冷却后再称重,补加甲醇至原重,滤过,弃去初滤液,收集续滤液,过0.45μm微孔滤膜,取10μl进样分析。

2.2.4 加样回收率实验 取车前子细粉5份各0.5g,精密称定,加入桃叶珊瑚苷标准品,以下实验方法按药典测定法进行。桃叶珊瑚苷平均回收率为96.75%,RSD为2.82%。

3 结果

3.1 不同产地车前子桃叶珊瑚苷含量 见表1。

3.2 同一产地不同贮存期车前子桃叶珊瑚苷含量 见表2。

表1 不同产地车前子桃叶珊瑚苷含量样品序号样品重(g)

表2 同一产地不同贮存期车前子桃叶珊瑚苷含量

4 讨论

4.1 高效液相色谱法经精密度实验检测,精密度良好,RSD为1.91%。

4.2 车前子为江西道地药材,由表1的实验结果发现,修 水渣津试验田的样品桃叶珊瑚苷含量最高,原因可能与产地生态环境和栽培措施有关。因此,为了提高药材的质量,有必要对车前的栽培和生长环境进行研究。

4.3 分析桃叶珊瑚苷含量测定结果,发现其含量随车前子贮存期的延长而渐渐减少。如贮存期为1年的车前子中桃叶珊瑚苷平均含量为0.4798mg/g,贮存期为2年的平均含量为0.1960mg/g,贮存期为3年的车前子中未检测出桃叶珊瑚苷。这表明桃叶珊瑚苷对光、酸、碱和酸敏感,易发生酸水解,存放长久后含量降低。这对判断药材的新鲜程度,确立加工贮存的方法和条件具有指导意义。

参考文献

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2 江苏新医学院.中药大辞典,上海:上海人民出版社,1977,403.

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8 郭月秋,沙明,曹爱明,等.高效液相色谱法测定车前中桃叶珊瑚苷的含量.中国中药杂志,1991,16(12):743-744.

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10 方芸,吴正红,裴云萍,等.高效液相色谱法测定车前草中桃叶珊瑚苷的含量.中国现代应用药学杂志,2001,18(2):136-137.

11 中国医学科学院,中国协和医科大学药物研究所,日本大正制药株式会社编著.常用中草药高效液相色谱分析,北京:科学出版社,1999,147-151.

作者单位:330006江西中医学院


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