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参制品中西洋参总皂甙测定方法的探讨

来源:中华实用医药杂志 作者:陈建英 蒋琦鸿 2005-8-3
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摘要: 西洋参为名贵的中药材之一,其中西洋参总皂甙是主要的有效成分,所以用西洋参总皂甙含量作为评价西洋参制品的客观质量标准。本文就本地市场销售的几种常见西洋参制品中西洋参总皂甙的测定,讨论西洋参总皂甙的分光光度比色测定法中的各种条件,认为该法对于基层防疫站检验该类产品质量以及企业质量控制是有效可行的......


    西洋参为名贵的中药材之一,其中西洋参总皂甙是主要的有效成分,所以用西洋参总皂甙含量作为评价西洋参制品的客观质量标准。本文就本地市场销售的几种常见西洋参制品中西洋参总皂甙的测定,讨论西洋参总皂甙的分光光度比色测定法中的各种条件,认为该法对于基层防疫站检验该类产品质量以及企业质量控制是有效可行的。

    1 材料和方法

    1.1 仪器和试剂 (1)仪器:721型分光光度计(上海第三分析仪器厂),可控温水浴锅,索氏抽提器。(2)试剂:无水甲醇、无水乙醚、硫酸、香草醛等均是分析纯。(3)样品与对照品溶液:西洋参总皂甙和人参皂甙Re均由中国药品生物制品检定所提供,分别精密称取后用甲醇溶解配成2mg/ml对照溶液。

    1.2 方法 本文实验方法参照《中华人民共和国卫生部进口药材部标准》(试行)(WS4-16-86)。

    2 实验部分

    2.1 样品溶液的制备

    2.1.1 花旗参茶(采用西洋参茎、须等粉碎袋装而成)取样品0.5g,精密称取,置于索氏抽取器内,加入无水乙醚80ml水浴回流2h以上,取出挥尽乙醚后再用60ml无水甲醇水浴回流4h,提取液减压回收至干。加蒸馏水溶解并定容到100ml,取此水溶液5ml,用水饱和的正丁醇萃取3次,每次10ml,合并正丁醇液。用10ml水洗涤,弃去水层,将正丁醇液减压回收,残渣用甲醇溶解并定容到10ml备用 [1]  。

    2.1.2 西洋参胶囊(100%西洋参)取样品1g,精密称取,按2.1.1中的方法进行制备。

    2.1.3 西洋参口服液(不含糖制品)精密吸取10ml加水定容到100ml,取水溶液5ml按2.1.1的方法进行制备。

    2.2 加硫酸量对显色的影响 由表1可见60%的硫酸响应值最大,故选择60%的硫酸。

    表1 硫酸浓度对显色反应的影响(略)
  
    2.3 波长的选择 用微量注射器分别吸取定量的西洋参总皂甙Re对照品溶液,按以上测定方法测定,二者在54.5 nm处有最大吸收峰。

    2.4 标准曲线的制作 分别精密吸取西洋参总皂甙和人参皂甙单体Re对照品溶液40、80、120、160μl。分别置于 10ml的具塞试管中,挥干试管内的甲醇,将试管置于水浴内精确加入0.5ml的香草醛—乙醇溶液和5ml60%硫酸溶液,混匀后置于60℃水浴中,以相应的试剂作空白,水浴15min后取出用721型分光光度计,在545nm波长处测定其吸光度,绘制标准曲线如图1所示。

    图1 西洋参对照品的标准曲线图

    3 结果

    取上述不同样品的提取备用液用微量注射器精密吸收200μl,分别置于10ml具塞试管中,按2~4中的操作方法测定其吸光度,分别在两种对照的标准曲线上求得各种样品中西洋参总皂甙和人参皂甙单体Re的含量,结果如表2。

    表2 不同标准品下所测得的各种样品西洋参总皂甙的含量(略)
  
    4 讨论

    4.1 关于样品中待测成分的提取 不同的样品其成份各异,有的样品中含脂类蛋白质较多,有的样品则含糖较多,对于含脂较多的需先乙醚脱脂,再用甲醇提取,其抽提时间直接影响到样品的测定结果。通过试验证明,对于1g以下少量取样,4h的甲醇抽提足够(用10%硫酸—乙醇溶液喷显,呈阴性)。糖分会引起干扰使显色反应的吸光度偏高引起误差,在实验中应加以注意。

    4.2 两种对照品对结果的影响 本文的实验发现用不同的对照品对测定结果有一定的影响,采用西洋参总皂甙对照较采用人参皂甙单体Re为对照结果偏高,因此笔者认为在检测西洋参制品的总皂甙含量时不宜采用人参皂甙单体Re作为对照品。

    (收稿日期:2004-06-13) (编辑清 泉)

    作者单位:213021江苏省常州市天宁区疾病预防控制中心 


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