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速率法与比色法测定丙氨酸氨基转移酶的比较

来源:《中华现代临床医学杂志》 作者:年晓华 2008-6-30
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摘要: 丙氨酸氨基转移酶是检测肝脏病变的重要指标,为了临床能够及时准确地得到检验结果,以及了解不同检验方法所得检验结果之间是否存在差异,对ALT速率法与比色法检验结果之间进行了比较,现报告如下。速率法试剂盒由中生北控生物科技股份有限公司生产,内备ALT标准液1000 u/L。比色法试剂盒由长春汇力生物技术有限公司......


     丙氨酸氨基转移酶是检测肝脏病变的重要指标,为了临床能够及时准确地得到检验结果,以及了解不同检验方法所得检验结果之间是否存在差异,对ALT速率法与比色法检验结果之间进行了比较,现报告如下。

    1  材料与方法

    1.1  仪器  BS-3000P半自动生化分析仪,产品编号:BS 013-0010,南京神州英诺华医疗科技有限公司生产。

    1.1.1  标本   49例清晨空腹之血液样本,36例健康者,13例肝病患者,均为女性。每例均由静脉取血3 ml放试管中备用。

    1.1.2  试剂  质控品为中生北控生物科技股份有限公司生产。速率法试剂盒由中生北控生物科技股份有限公司生产,内备ALT标准液1000 u/L。比色法试剂盒由长春汇力生物技术有限公司生产,内备标准品100 u/L。所有试剂均在规定的有效期内使用。

    1.2  方法  具体方法有:(1)将49例血标本以2000 r/min离心5 min取出备用,无论是速率法还是比色法均与其质控品同步操作。速率法按其试剂盒使用说明的操作方法操作,比色法也按其试盒使用说明的操作方法操作。(2)速率法用波长340 nm,温度37 ℃,比色杯光径1 cm,用水做空白,在反应温度保温1 min,读取初始吸光度,线性范围0~600 μ/L,正常参考值0~31 u/L。比色法用下列参数上机测定,波长510 nm,温度25 ℃,延时期2 s,测量时间2 s,用试剂做空白,标准值100 u/L,吸入量1000 ul,参考值0~50 u/L,空白吸光度A510 nm<0.35,线性范围50~200 u/L,相关系数r>0.99,批内cr≤15%,批间cr≤18%,准确性偏差<5%。

    2  结果

    比色法36例健康者血标本测得结果在2~21,均在正常参考值之内,13例肝病患者血标本测得结果在61~127,确为异常,质控有效,结果可信。速率法36例健康者血标本测得结果在1.7~19.2,也均在正常参考值之内,13例肝病患者血标本测得结果在54~109,确为异常,质控有效,结果可信。

    比色法与速率法对49例血样本测定的结果基本一致,都能反映出ALT的高低以及肝病的轻与重,在其试剂盒线性范围内各自测得值均是可信的。

    3  讨论

    速率法与比色法所测得的ALT结果基本一致,都在质控范围之内,都是可信赖的检验结果,最大的差别是检验结果快还是慢的问题。速率法应注意的问题是:测定时间1 min,△A/min大于0.340样品用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。试剂空白吸光度小于1.000时勿用。该试剂是一步法所用,为防止人血清内丙酮酸干扰,试剂加样品60 s后测定为宜。对ALT活力值异常高的患者,样品在半自动生化分析仪上测定,结果容易出现假阴性,应结合临床症状将样品稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数,试剂保存应在2 ℃~8 ℃条件下贮存,否则无效。

    比色法应注意的是:标准液值直接存入分析仪内较好。测得样品值如超出线性范围也应稀释重新测定,结果乘以稀释倍数,试剂也应按要求贮存。

    对于ALT值极高的样本,速率法可能为阴性,比色法也可使测得值失真,速率法出现这种现象比较隐匿,而比色法可通过肉眼发现问题,但要得到准确结果都必须稀释样本重新测定,应该与临床症状相结合,这是克服这种异常结果的正确方法。在这两种测定方法的各自线性范围以内,所测得的结果都是可信的,都没有出现异常现象。比色法所需时间较长,如果是对急诊患者,就没有长处可言。而速率法省时省力,很快就会取得结果,所以笔者认为速率法是测定ALT的当前最好方法,只要按正规要求去操作并与临床相结合,那么它的测得值就一定准确而可信,这一方法也将不断完善而加以推广。


作者单位:028400 内蒙古开鲁,开鲁县妇幼保健所


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