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增龄一号对免疫力低下小鼠非特异性免疫功能的影响

来源:《齐鲁医学杂志》 作者:赵振寰,孙向红,刘洪玲,孙伟 2008-5-29
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摘要: 【摘要】 目的 探讨增龄一号对环磷酰胺所致免疫力低下小鼠非特异性免疫功能的影响,观察剂量与效果的关系。方法 小鼠随机分为6组,空白组和模型组灌胃给予注射用水,阳性对照组灌胃贞芪扶正颗粒,3个剂量药物组分别灌胃低、中、高剂量增龄一号,连续灌胃14 d。于灌胃的第10天开始,除空白组腹腔注射生理盐水外,其......


【摘要】  目的 探讨增龄一号对环磷酰胺所致免疫力低下小鼠非特异性免疫功能的影响,观察剂量与效果的关系。方法 小鼠随机分为6组,空白组和模型组灌胃给予注射用水,阳性对照组灌胃贞芪扶正颗粒,3个剂量药物组分别灌胃低、中、高剂量增龄一号,连续灌胃14 d。于灌胃的第10天开始,除空白组腹腔注射生理盐水外,其余组腹腔注射环磷酰胺,制备免疫力低下模型。做碳粒廓清实验,称量肝、脾、胸腺质量,观察非特异性免疫功能变化。结果 模型组小鼠廓清指数明显下降,阳性对照组及增龄一号中、高剂量组廓清指数显著增强。模型组胸腺和脾质量显著降低,肝脏质量明显增加,增龄一号对胸腺和脾质量影响不明显,能使环磷酰胺导致的肝脏质量增加减轻。结论 增龄一号能够增强免疫力低下小鼠的非特异性免疫功能,可能对肝脏具有保护作用。

【关键词】  增龄一号;中草药;免疫,天然;碳粒廓清实验

    EFFECTS OF ZENGLING1 ON NONSPECIFIC IMMUNOLOGICAL FUNCTION OF HYPOIMMUNINY MICEZHAO ZHENHUAN, SUN XIANGHONG, LIU HONGLING,  et al (Department of Pharmacy,The Affiliated Hospital of Qingdao University Medical College, Qingdao 266003, China) [ABSTRACT]ObjectiveTo study the immunomodulation of traditional Chinese compound prescription, Zengling1, on nonspecific immunological function of hypoimmunity mice and observe the relationship between the dosage and efficacy. Methods The mice were divided into six groups. Except for the blank control group which were given water for injection, all the other five groups were given cyclophosphamide intragastrically to induce immunosuppression. Ten days before cyclophosphamide administration, intragastric administration of Zhen Qi Fu Zhen granules, or Zenling1 at low, moderate and high dose or saline were given to different groups respectively, which lasted for 14 days. The immune organs were weighed  and the carbon particle clearance test performed. ResultsThe clearance test was significantly decreased in groups with cyclophosphamide and saline administration. In addition, the weight of thymus and spleen decreased. The weight of liver  increased. While in the groups treated with Zhen Qi Fu Zhen granules or Zenling1 at moderate or high dose, the carbon clearance rate increased. The weight of liver  decreased. But the weights of thymus and spleen were not obviously affected.ConclusionZengling1 could increase the nonspecific immune function of hypoimmunity mice and may have a protective effect against liver damage.

    [KEY WORDS]Zengling1; drugs, Chinese herbal; immunity, natural; carbon particle clearance test

    增龄一号是在我院一经验处方的基础上,通过对中医衰老机制的研究,精心选择十味临床常用而有效的中草药组成[1,2]。本实验观察了增龄一号对小鼠非特异性免疫功能的影响。

    1  材料与方法

    1.1  材料

    1.1.1  药物  注射用环磷酰胺(江苏恒瑞医药股份有限公司生产,批号06021821);贞芪扶正颗粒(上海静安制药有限公司生产,批号0601161);增龄一号口服液(青岛大学医学院附属医院中药房提供)。

    1.1.2  动物  昆明种小白鼠,体质量18~22 g,雌雄各半,由青岛市药检所提供。

    1.1.3  试剂和主要仪器  一得阁墨汁(北京一得阁有限责任公司生产),1 g/L的碳酸钠溶液(中国海洋大学药物所配制);722型分光光度计(上海精密科学仪器有限公司生产)。

    1.2  方法

    1.2.1  动物分组及给药方法  将小鼠随机分为6组:空白组、模型组、阳性对照组及增龄一号低、中、高剂量组,每组10只。各组每天灌胃一次,每次0.02 mL/g体质量,连续灌胃14 d。空白组和模型组灌胃给予注射用水,阳性对照组灌胃贞芪扶正颗粒,增龄一号低、中、高剂量组灌胃增龄一号(中剂量组为人的正常剂量按体表面积换算为小鼠的剂量,低剂量组为中剂量组的1/2,高剂量组为中剂量组的2倍)。于灌胃的第10天开始,除空白组注射生理盐水外,模型组、阳性对照组及增龄一号低、中、高剂量组于灌胃后腹腔注射环磷酰胺80 mg/kg[3],连续 4 d,制备免疫力低下模型。1.2.2  碳粒廓清法[4]  第14天灌胃2 h后,尾静脉注射体积比1∶4稀释的墨汁,分别于尾静脉注射后2、10 min,用定量毛细管于球后毛细血管丛取血20 μL,溶于3 mL 1 g/L Na2CO3溶液中。用毛细管吹打均匀,置722型分光光度计在波长680 nm下比色,测定吸光度值(A)。然后,将小鼠颈椎脱臼处死,分别取肝、脾、胸腺并称质量。按下式计算廓清指数:K=(logA1-logA2)/(t2-t1),校正廓清指数α=体质量/肝脾质量×3K。

    1.2.3  数据处理  数据以±s表示,各组均与模型组比较,组间比较采用t检验

    2  结    果

    2.1  对免疫器官的影响

    环磷酰胺使小鼠胸腺和脾脏质量显著降低(t=4.15、7.52,P<0.01)。增龄一号对胸腺、脾脏质量的影响不明显(t=0.54~1.96,P>0.05)。环磷酰胺使小鼠肝脏质量显著增加(t=4.37,P<0.01)。增龄一号能对抗环磷酰胺的这种作用,使肝质量/体质量比值减小,其中高剂量组的作用最为明显(t=3.40,P<0.01),低、中剂量组差异也有显著性(t=2.83、2.65,P<0.05)。见表1。

    2.2  对廓清指数的影响

    增龄一号对校正廓清指数α有提高且呈剂量依赖性,低剂量时有所提高但差异不明显(t=1.97,P>0.05),而中剂量对廓清指数有显著性提高(t=2.86,P<0.05),高剂量对廓清指数有极显著性提高(t=3.36,P<0.01)。表1  增龄一号对小鼠免疫器官质量的影响表2  增龄一号对小鼠廓清指数的影响

    3  讨    论

    增龄一号中的首乌可补益肝肾,养血祛风;黄芪补气固表,生肌排脓,利尿退肿;灵芝养心安神、益气补血、止咳祛痰、健脾安神、延年益寿;当归补血活血、调经止痛、润肠通便;刺五加祛风健骨,活血利水,益气。

    胸腺、脾脏质量法可供中药初筛时用,若研究结果与其他免疫指标所得结果平行,则该结果较为可靠[4]。本实验表明,增龄一号对胸腺和脾脏的质量没有明显影响。单核吞噬细胞功能测定是研究非特异性免疫功能的重要实验方法,增龄一号对廓清指数有明显影响,提示该药在适当的剂量下,对小鼠非特异性免疫功能有增强作用。

    刘钰瑜等[5]的研究显示,环磷酰胺在小剂量时(1.5、4.5 mg/kg)能使肝脏质量减轻,当剂量较大时(13.5 mg/kg)肝脏反而有质量增加的趋势。施畅等[6]观察了异环磷酰胺对大鼠肝脏毒性作用,发现肝小叶中央区肝细胞空泡变性,肝细胞点状及小灶性坏死,坏死区和汇管区慢性炎细胞浸润,线粒体高度肿胀,嵴断裂,排列紊乱,粗面内质网扩张,部分脱颗粒,滑面内质网扩张呈囊泡状改变。施畅等[7]比较了环磷酰胺与异环磷酰胺致肝毒性的机制,异环磷酰胺与环磷酰胺对肝脏的毒性作用机制有相同之处,但异环磷酰胺对肝脏的毒性明显弱于环磷酰胺。本实验所用环磷酰胺剂量为80 mg/kg,肝脏质量增加明显,其原因可能与上述机制有关。环磷酰胺使小鼠肝脏质量增加可能是肝损害的一种表现,本实验表明增龄一号使环磷酰胺导致的肝脏质量增加减轻,提示增龄一号对肝脏可能具有保护作用,但需要进一步证实。

    衰老是机体各种生化反应的综合表现,是体内外许多因素共同作用的结果。随着年龄的增长,机体的免疫器官逐渐萎缩,免疫功能逐渐衰退,对外界病原体的抵抗能力明显减弱,这是引起衰老的原因之一。中药主要是通过延缓免疫器官的衰退和提高机体的免疫功能来延缓衰老[8]。增龄一号能够增强机体免疫力、抗衰老的机制,有待于进一步研究。

【参考文献】
  [1]许士凯,李恕. 抗衰老药物研究的思路与途径[J]. 现代中西医结合杂志, 2005,14(11):13961398.

[2]王学宏,李明春. 中药多糖的免疫及抗肿瘤作用研究进展[J]. 齐鲁医学杂志, 2000,15(3):230231.

[3]高苋,钱嘉林,刘长喜,等. 环磷酰胺对小鼠免疫抑制的动物模型建立[J]. 环境与职业医学, 2004,21(4):314318.

[4]李仪奎. 中药药理实验方法学[M].上海:上海科技出版社,1992.

[5]刘钰瑜,吴铁,崔燎,等. 川芎嗪防治环磷酰胺不良反应的作用探讨[J]. 中华临床医药, 2001,2(6):1317.

[6]施畅,王和枚,廖明阳. 异环磷酰胺对大鼠肝脏毒作用及其机理探讨[J]. 中国公共卫生, 2001,l7(5):388390.

[7]施畅,廖明阳. 环磷酰胺与异环磷酰胺致肝毒性机制的比较[J]. 卫生毒理学杂志, 2000,14(2):99102.

[8]王洪侠,高微微. 抗衰老中药的研究进展[J]. 中国中医药信息杂志, 2005,12(1):102104.


作者单位:(青岛大学医学院附属医院药剂科,山东 青岛 266003)


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