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实时荧光PCR检测女性生殖道Ct和Uu结果分析

来源:中国热带医学 作者:胡茜 王玉丰 2010-1-13
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摘要: 【摘要】 目的 了解三亚地区育龄期妇女沙眼衣原体(Ct)、解脲支原体(Uu)的感染状况。 方法 应用实时荧光PCR法对来医院就诊的1 560例育龄期妇女按常规取样本进行Ct、Uu检测后分析。 结果 单项Uu阳性率为33。7%,单项Ct阳性率为12。...


【摘要】  目的 了解三亚地区育龄期妇女沙眼衣原体(Ct)、解脲支原体(Uu)的感染状况。 方法 应用实时荧光PCR法对来医院就诊的1 560例育龄期妇女按常规取样本进行Ct、Uu检测后分析。 结果 单项Uu阳性率为33.7%,单项Ct阳性率为12.3%,Ct、Uu混合感染为5.5 %。总阳性率为51.5%(804/1 560)。 结论 开展育龄期妇女泌尿生殖道Ct、Uu感染的筛查,对控制性病的传播和预防妇科合并症具有重要意义。

【关键词】  实时荧光PCR 沙眼衣原体 解脲脲原体


  沙眼衣原体(Ct)和解脲脲原体(Uu)均为临床常见的性传播疾病病原体,不仅可导致阴道、尿道感染,上行的生殖道感染还可累及子宫内膜、输卵管和邻近的盆腔结构,引起宫颈炎、盆腔炎及输卵管不育症等。Ct感染的母亲还可通过垂直传播引起婴儿眼结膜炎、肺炎等。因此,对育龄期妇女开展Ct、Uu的筛查对控制性病的传播和防治妇科合并症的发生具有重要意义。
   
  为了解三亚地区育龄期妇女生殖道Ct、Uu的感染情况,供防治工作参考,我们选用灵敏度高、特异性强的实时荧光PCR(Real-Time PCR)技术对来医院就诊的1 560例可疑感染者采样进行检测,现将检测结果报告如下。

  1  材料和方法

  1.1  受检对象  2005~2006年在海南省第三人民医院妇科及皮肤性病科就诊的1 560例育龄期女性,年龄在17~43岁之间,平均年龄为26岁。

  1.2  标本采集  先用棉拭子将宫颈口的分泌物擦去,用扩阴器扩阴,再换取样棉拭子伸入宫颈,通过上皮交界处直到看不到拭子头,旋转10~20s,取出拭子(别碰到阴道的鳞状上皮,以保证取到更多的柱状上皮标本),将棉拭子放入1.0ml无菌生理盐水中漂洗片刻,在壁上挤干后丢弃棉拭子,密闭标本试管,立即送检。

  1.3  试剂和设备  Ct-、Uu-DNA  PCR试剂盒均购自深圳市匹基生物工程有限公司; FQD-33A 型荧光定量PCR仪为杭州大和热磁电子有限公司生产。

  1.4  实时荧光PCR检测  每批检测均严格按仪器及试剂盒说明书操作,并设立阴、阳性对照。

  2  结果
   
  对1 560例育龄期女性宫颈分泌物的Uu、Ct检测结果,总阳性人数为804例,总阳性率51.5%。其中单项Uu阳性526例,阳性率33.7%;单项Ct阳性192例,阳性率12.3%, Uu、Ct两项均阳性为86例,阳性率5.5%。

  3  讨论
   
  近年来,由Ct、Uu等引起的泌尿生殖道感染发病率呈上升趋势。据报道,全世界每年有5千万例泌尿道Ct感染,在我国有些地区非淋菌性尿道炎发病率已超过淋病,以至很多人建议将非淋菌性尿道炎感染作为一个独立的检测项目[1]。由于女性生殖道感染Ct、Uu后,症状多较为隐匿且缺乏特异性,造成就诊率较低,在本次对1 560例来院就诊的育龄期女性的调查中,Uu阳性率高达39.2%,Ct阳性率为17.8%,Ct、Uu混合感染也高达5.5%。由此估计Ct、Uu在三亚市女性自然人群中的感染率不会很低。
   
  检测CT、Uu的方法很多,本次采用实时荧光PCR技术检测Ct、Uu的核酸(DNA),具有灵敏度高、特异性强及检测耗时少(一般仅需1~2h)等特点,尤为适用于Ct等难培养病原体的检测。但值得注意的是,由于该技术检测的靶物质是病原体的核酸,如患者在治疗有效后病灶处还残留有已死亡的病原体,此时进行PCR则可将病原体基因扩增出来[2]。因此,使用PCR法检查Ct、Uu应在患者接受治疗前或停药2周后进行。
   
  女性感染Ct、Uu后往往因症状隐匿而易被忽视,但却对生殖健康造成严重损害,因此,选择一种快速、准确的检测方法在人群中尤其在育龄期妇女中定期开展Ct、Uu感染的筛查尤为重要。实时荧光PCR作为一项新的成熟技术,不但具有耗时少、灵敏度高、特异性强,而且还可以监测扩增全过程,显示出其对Ct、Uu感染诊断的明显优势,值得推广使用。

【参考文献】
    [1] 姜磊,李志坚. 泌尿生殖道沙眼衣原体的检测[J]. 中华检验医学杂志,2003,26(1):58~59.

  [2] 霍虹,王清涛,李金明. 沙眼衣原体聚合酶链反应检测研究进展[J]. 中华检验医学杂志,2006,29(11):1038~1040.


作者单位:保亭县人民医院检验科,海南 保亭 572300; 海南省第三人民医院检验科,海南 三亚 572000.


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