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雌、雄激素对前列腺中IGF-I基因表达的影响

来源:中华泌尿外科杂志 作者:姜辉朱积川许清泉叶海云王晓峰侯树坤 2004-10-14
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摘要: 【摘要】目的探讨雌、雄激素对前列腺中胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因表达的影响。方法采用斑点杂交结合图像分析技术,观察药物去势和未药物去势BPH患者前列腺组织以及正常组、去势组、外源性雄激素组、雌激素组大鼠前列腺组织中IGF-ⅠmRNA表达情况。结果人体内睾酮水平降低后,前列腺中IGF-Ⅰ基因表达明显减少。正常大......


  【摘要】 目的 探讨雌、雄激素对前列腺中胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因表达的影响。 方法 采用斑点杂交结合图像分析技术,观察药物去势和未药物去势BPH患者前列腺组织以及正常组、去势组、外源性雄激素组、雌激素组大鼠前列腺组织中IGF-ⅠmRNA表达情况。 结果 人体内睾酮水平降低后,前列腺中IGF-Ⅰ基因表达明显减少;正常大鼠前列腺中IGF-ⅠmRNA表达量是去势大鼠的2.6倍,给予外源性睾酮后两组IGF-ⅠmRNA表达量变化不大;雌激素组大鼠前列腺中IGF-ⅠmRNA表达量明显高于正常组,平均表达量为正常组的1.8倍。 结论 雌、雄激素可以调节前列腺中IGF-ⅠmRNA表达量,IGF-ⅠmRNA表达改变可能与前列腺体积变化相关。

  Effect of estrogen and androgen on expression of IGF-ⅠmRNA in prost atic tissues

  JIANG Hui, ZHU Jichuan, XU qingquan, et al.

  (Department of U rology,People's hospital,Beijing Medical University,Beijing 100044,China)

  【Abstract】 Objective To investigate estrogen and andro gen on the regulation of gene expression of insulin-like growth factorⅠ(IGF- Ⅰ)mRNA in prostatic tissues. Methods IGF-ⅠmRNA was quantitat ively ass essed in BPH and SD rat prostatic tissues using dot blot hybridization technique . Results With the decrease of serum testosterone levels ,the exp ression values of IGF-ⅠmRNA in BPH tissues decreased significantly; the mRNA l e vels in normal rats were significant higher than those in castrated rats(2.6 fol d),yet with no difference of IGF-ⅠmRNA levels between the exogenic testosteron e group and normal group;In contrasted and normal rats,IGF-ⅠmRNA expressions with the injection of estradiol were significant higher(1.8 fold). Conclusions Androgen can regulate the gene expression of IGF-Ⅰin bPH and rat prostate,and estrogen may upregulate IGF-ⅠmRNA level.IGF-Ⅰmay p lay an important role in the development of BPH.

  【Key words】 Prostatic hyperthophy  Sex hormones

  采用分子杂交法研究雌、雄激素对前列腺中IGF-Ⅰ基因表达的影响,探讨其在BPH发病中的作用。

  材料和方法

  一、材料

  1.人体前列腺组织:BPH患者20例。分服药组与未服药组,每组10例。服药组于术前一周开始服甲孕酮120mg/d,己烯雌酚2mg/d。于术晨抽血测血清睾酮水平,前列腺标本取自耻骨上经膀胱前列腺摘除术,并经病理证实。新鲜标本离体后,立即制成小块置于液氮中保存备用。

  2.大鼠前列腺组织:SD大鼠40只,分四组,每组10只。(1)正常组;(2)去势组:双侧睾丸切除后第4日摘取标本;(3)去势+睾酮组:行双侧睾丸切除,并于手术日开始每日皮下注射睾酮0.1mg,4d后摘取标本;(4)雌激素组:每日皮下注射2mg雌二醇,4d后处死。四组大鼠喂养条件相同,断颈处死,摘取腹侧前列腺组织放入液氮中保存备用。

  3.IGF-Ⅰ探针质粒来自国家计生委科研所分子生物室。探针制备简述如下:已插入基因探针的质粒转染DH-5α大肠杆菌→大量制备质粒DNA→酶切制备线性cDNA→探针标记→探针检测。

  4.Renaissance随机引物荧光素标记试剂盒和CDP-Star核酸化学发光检测试剂盒购于美国杜邦公司。

  二、方法

  1.斑点杂交:提取组织总RNA→测定浓度→点膜→烤膜固定→杂交→摇洗→发光反应→显影、定影→图像分析。

  2.图像分析与数据处理:采用多媒体图文分析系统对斑点杂交信号进行辉度分析,测杂交斑点吸光度A值。

  统计学方法采用t检验进行两两比较。

  结  果

  一、人体前列腺组织IGF-Ⅰ基因表达情况

  1.睾酮水平:服药组术前为(27.0±5.2)mg/L,均达到去势水平(<40mg/L);未服药组术前为(537.6±102.9)mg/L,两组相比差异有显著性(P<0.01)。

  2.未服药组IGF-ⅠmRNA表达水平高于服药组,吸光度A值分别为266.6±8.4和189.5±5.6,二者比值为1.4,二组相比P<0.05。

  二、大鼠前列腺组织IGF-Ⅰ基因表达情况

  1.雄激素对IGF-I表达的调节:去势后IGF-ImRNA表达显著低于正常组,图像分析显示正常组和去势组吸光度A值分别为501.7±11.4和191.8±6.8(P<0.01),两组比值为2.6;而外源性睾酮组与正常组比较表达变化不大,吸光度A值分别为446.5±7.2和501.7±11.4(P>0.05),二者比值为0.9。

  2.雌激素对IGF-I表达的调节:雌激素组与正常组吸光度A值分别为903.9±15.4和501.7±11.4(P<0.01),二者比值为1.8,雌激素组IGF-ImRNA表达明显高于正常组。

  讨  论

  IGF-I是一种重要的促细胞生长和分化因子,是潜在的上皮细胞有丝分裂原。IGF-ImRNA在人体肝、脑、肾、乳腺、卵巢和胃肠道等许多组织中表达。我们曾采用原位杂交法证实IGF-ImRNA在前列腺上皮和间质组织中表达,并认为IGF-I在前列腺局部以自分泌和旁分泌方式发挥作用,与BPH发生有关[1]。Barni等[2]报告IGF-ImRNA在BPH组织中的表达强于正常前列腺组织。Chun等[3]报告IGF-I可以抑制卵泡细胞的凋亡,间接起到促增生作用。由此可见IGF-I的作用是复杂的、多样性的。


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