当前位置:首页 > 合作平台 > 医学论文 > 基础医学论文 > 组织胚胎学 > 猪去细胞主动脉瓣组织学及生物力学特征

猪去细胞主动脉瓣组织学及生物力学特征

来源:第四军医大学学报 作者:金振晓刘维永 2004-9-29
336*280 ads

摘要: 摘要: 目的观察猪主动脉瓣叶去细胞后的组织学和理化性能变化,探讨其作为未来“杂种”瓣膜支架的可能性.方法新鲜采集的猪主动脉瓣叶经表面活性剂、核酸酶、渗透压变化作用,去除瓣叶组织的细胞成分,在光镜、电镜下观察组织学变化,测定瓣叶组织的含水量、可溶性蛋白含量、热皱缩温度、瓣叶厚度、描计了应力应变曲线.结......


  摘 要: 目的 观察猪主动脉瓣叶去细胞后的组织学和理化性能变化,探讨其作为未来“杂种”瓣膜支架的可能性.方法 新鲜采集的猪主动脉瓣叶经表面活性剂、核酸酶、渗透压变化作用,去除瓣叶组织的细胞成分,在光镜、电镜下观察组织学变化,测定瓣叶组织的含水量、可溶性蛋白含量、热皱缩温度、瓣叶厚度、描计了应力应变曲线.结果 成功地去除了猪主动脉瓣组织中的细胞成分;瓣叶去细胞后组织含水量明显增高[φ(94.6±0.3)% vs (91.2±2.0)%,P<0.01],可溶性蛋白含量明显降低[ω(0.041±0.008)% vs (0.056±0.006)%,P<0.05];热皱缩温度[(72.0±0.7)℃ vs (71.2±0.8)℃,P>0.05],瓣叶厚度[(0.8±0.3) mm vs (0.7±0.3) mm,P>0.05],断裂强度[(646±133) g·mm-2 vs (650±105) g·mm-2, P>0.05]和断裂伸长率[(57±14)% vs (65±18)%,P>0.05]均无明显差别.结论 采用表面活性剂、核酸酶结合渗透压变化的方法,能够成功地去除猪主动脉瓣组织的细胞成分,且不影响组织的理化性能,有可能作为纤维支架,用于构建“杂种”生物瓣膜.

  引言

  大量研究表明,异种生物瓣钙化与瓣膜中的细胞成分关系密切.我们将瓣膜组织中细胞成分去除,研究了其组织学变化,测定了力学强度,探讨其能否作为组织工程瓣膜的异种纤维支架,取得了初步的实验结果.

  1 材料和方法

  1.1 材料 ①新鲜猪主动脉瓣与4℃ hanks液中带回实验室,洗尽血液,轻轻擦去内皮,作为新鲜瓣(F组, n=25). ②去细胞瓣叶的制备[1,2]:瓣叶于10 mL·L-1 triton X-100 0.01 mol·L-1 Tris缓冲液中(20 mL+PMSF 100μL/片),4℃下持续振荡24 h;转入10 mL·L-1 triton X-100 1.5 mol·L-1 KCl溶液,同样作用24 h;0.01 mol·L-1 Tris Cl溶液充分洗涤(20 mL/片,振荡洗涤10 min×6次);转入100 mL DNA酶、RNA酶工作液中,加DNA酶2 mL,RNA酶100μL ,37℃水浴过夜;转入低渗Triton X-100液中,4℃振荡24 h,充分洗涤.为去细胞瓣(aF组 n=25) .

  1.2 方法 新鲜瓣叶去细胞前后分别测定瓣叶可溶性蛋白含量、含水量、热皱缩温度、断裂强度、断裂伸长率.标本经固定后常规制作电镜、光镜标本,观察组织结构.

  统计学分析:结果以X±s表示,采用t检验对所有数据进行统计学分析.

  2 结果

  瓣叶去细胞后组织含水量明显增高[φ(94.6±0.3)% vs (91.2±2.0)%,P<0.01],可溶性蛋白含量明显降低[ω(0.041±0.008)% vs (0.056±0.006)%,P<0.05];热皱缩温度[(72.0±0.7)℃ vs (71.2±0.8)℃,P>0.05],瓣叶厚度[(0.8±0.3) mm vs (0.7±0.3) mm,P>0.05],断裂强度[(646±133) g·mm-2 vs (650±104) g·mm-2,P>0.05]和断裂伸长率[(57±14)% vs (65±18)%,P>0.05]均无明显差别.

  新鲜瓣(F组)瓣叶组织常规病理切片,HE染色,光镜下观察,见瓣叶表面内皮细胞绝大部分已被擦去,纤维层、松质层、室层三层结构完整,纤维细胞无自溶现象,纤维结构无损伤(Fig1a).扫描电镜下,见表面无细胞成分残留,暴露出粗大的纤维,比较紊乱,深层纤维仍呈波浪状结构(Fig2a).去细胞(aF组)瓣叶经常规切片染色,光镜下观察,见瓣叶组织中细胞成分完全消失,纤维层、松质层、室层三层结构在失去细胞后,单凭纤维网架亦可清晰辩认,纤维网之间的空白区,应该是原先纤维细胞占据的位置(Fig1b);扫描电镜下见表面没有任何细胞成分残留,波浪状结构保存完好,排列规则,连极细小的纤维都能保存(Fig2b);透射电镜下见交错排列的胶原纤维的纵剖面和横断面,纤维横纹清晰,结构无破坏(Fig3a,3b).

        

                          图1 瓣叶组织光学显微镜观察

  fig 1 The valve tissue under light microscope HE×20

  a: Fresh valve; b: Acellular valve.

         

                             图2 瓣叶组织扫描电镜观察


医学百科App—医学基础知识学习工具


页:[1] [2] [下一页] 
返回顶部】【打印本文】【放入收藏夹】【收藏到新浪】【发布评论



察看关于《猪去细胞主动脉瓣组织学及生物力学特征》的讨论


关闭

网站地图 | RSS订阅 | 图文 | 版权说明 | 友情链接
Copyright © 2008 39kf.com All rights reserved. 医源世界 版权所有
医源世界所刊载之内容一般仅用于教育目的。您从医源世界获取的信息不得直接用于诊断、治疗疾病或应对您的健康问题。如果您怀疑自己有健康问题,请直接咨询您的保健医生。医源世界、作者、编辑都将不负任何责任和义务。
本站内容来源于网络,转载仅为传播信息促进医药行业发展,如果我们的行为侵犯了您的权益,请及时与我们联系我们将在收到通知后妥善处理该部分内容
联系Email: