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五、几种简便常用的微循环障碍动物模型复制方法

来源:医用实验动物学 作者: 2006-1-13
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摘要: 五、几种简便常用的微循环障碍动物模型复制方法 (一)高分子右旋糖酐(HMWD)法 选择2~3公斤的健康家兔,雌雄不限。复制模型当天禁食、禁水。实验前观察眼球结膜微循环,采用微血管光滑、血流正常的动物,于清醒状态下复制模型。将平均分子量为20~40万的HMWD配成10%生理盐水溶液,以7~15ml/kg体重的剂量给家兔作耳缘......


  五、几种简便常用的微循环障碍动物模型复制方法

  (一)高分子右旋糖酐(HMWD)法

  选择2~3公斤的健康家兔,雌雄不限。复制模型当天禁食、禁水。实验前观察眼球结膜微循环,采用微血管光滑、血流正常的动物,于清醒状态下复制模型。HMWD是一种多聚化合物,它能在红细胞间形成较多的稳定的间桥,表面桥力大于原来的电荷排斥力,从而造成红细胞聚集;加之其本身又是一种高粘度物质,还可增加血粘度。将平均分子量为20~40万的HMWD配成10%生理盐水溶液,以7~15ml/kg体重的剂量给家兔作耳缘静脉快速推注,如在用药同时作动物球结膜微循环活体观察,则可见到球结膜微循环中出现逐渐加强的血流缓慢,血细胞聚集,最后出现流动中的血细胞团块。用药前家兔眼球结微膜血管中的微动脉和毛细血管呈树枝状分布,微静脉常与微动脉平行,血管由粗到细,光滑均交,微血流呈带状或线状,偶可见到流动很快的粒线状血流,但不会有血细胞聚集的颗粒状血流出现。微动脉因血流较快呈线带状,常常不易看清其中的血细胞流动;毛细血管,特别是近瞳孔处的毛细血管网的血流常呈粒线状流动。正常时微血管周围无出血及渗出,因此微血管背景较白(巩膜),视野清晰。用药后,眼球结膜微循环中可见下列典型的急性微循环障碍表现:①毛细胞血管和微静脉中红细胞流速明显减慢,因此血流呈断线状、虚线状或粒状,局部区域甚至完全停滞;②微血管中出现明显的血细胞聚集,严重时见流动中的血细胞团块;③有时尚可见到微血管发生轻度痉挛,微血管周围有渗出和出血以及微静脉中有血细胞贴壁翻滚的现象。用药后24小时内,上述急性微循环障碍表现最严重,少数动物可因急性栓塞而突然死亡,也有少数动物出现偏瘫症状。存活者,如经仔细护理,则72小时后HMWD破坏、排泄,微循环障碍逐渐好转。经测定,在此种急性微循环障碍模型中,动物血粘度明显升高,红细胞电泳变慢,血沉加速。

  这种急性微循环障碍动物模型的复制方法简便,出现快,成功率高(95%以上),适于探索与急性微循环障碍有关的各种疾病的发病机制及药物作用原理的研究。

  (二)胎儿羊水静脉注射法

  给家兔以1~4ml/kg体重的剂量静脉注射新鲜的胎儿羊水,可复制成急性微循环障碍动物模型。对注射动物进行活体微循环观察时发现,注射完毕时,即有血细胞流动速度减慢,毛细血管中可常见到微血流的间歇性流动,呈红白交替现象,在微静脉或较大的毛细血管中还常可见到随血流流动的透明细胞(可能为羊水细胞),20分钟后,微血流明显淤滞,局部出现凝血,微循环和较大的毛细血管中出现体积逐渐加大的白色团块,这可能是流动中的白色血栓(以羊水细胞为核心构成血栓)。注后1小时左右,大部分微血管停止流动,仅有部分微血管中可见血流缓慢移动,而且常可出现栓塞所致的突然死亡。这种急性微循环障碍动物模型的复制成功率,常随羊水的质量而异。

  (三)兔脑粉浸出液静脉注射法

  取新鲜兔脑粉100mg,加生理盐水5ml,50℃温箱孵育20分钟,取上清液备用。给家兔耳缘静脉推注上述溶液,剂量为1~4ml/kg体重,同时可给1/4m CaCL24ml,必要时还可添加少量乳酸静脉注射。

  球结膜微循环观察所见与HMWD复制的模型类似。此法最大的缺点是剂量不易控制,每个动物对兔脑粉浸出液(代替凝血酶)的敏感程度不一,用量太小,急性微循环障碍表现不显;剂量稍大,动物可发生突然死亡,必须十分注意。


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