三、实验室检测

摘要：HIV/AIDS的实验室检测方法包括HIV抗体、病毒载量、CD4+ T淋巴细胞、P24抗原检测等。HIV1/2抗体检测是HIV感染诊断的金标准，病毒载量测定和CD4+ T淋巴细胞计数是判断疾病进展、临床用药、疗效和预后的两项重要指标。小于18月龄的婴儿HIV感染诊断可以采用核酸检测方法，以2次核酸检测阳性结果作为诊断的参考依据，18月龄以......

HIV/AIDS的实验室检测方法包括HIV抗体、病毒载量、CD4+ T淋巴细胞、P24抗原检测等。HIV1/2抗体检测是HIV感染诊断的金标准，病毒载量测定和CD4+ T淋巴细胞计数是判断疾病进展、临床用药、疗效和预后的两项重要指标。小于18月龄的婴儿HIV感染诊断可以采用核酸检测方法，以2次核酸检测阳性结果作为诊断的参考依据，18月龄以后再经抗体检测确认。

　　（一）HIV1/2抗体检测：包括筛查试验（含初筛和复测）和确认试验。

　　HIV1/2抗体筛查检测方法包括酶联免疫试验（ELISA）、快速检测（快速试纸条和明胶颗粒凝集试验）等。ELISA是常用的抗体筛查方法，但随着自愿咨询检测（VCT）工作的开展，也可采用快速检测。HIV抗体确认试验常用的方法是免疫印迹法（WB）。

　　筛查试验呈阴性反应可出具HIV1/2抗体阴性报告。筛查试验呈阳性反应，不能出具阳性报告，只可出具“HIV抗体待复查”报告。经确认试验HIV-1（或HIV-2）抗体阳性者，出具HIV-1（或HIV-2）抗体阳性确认报告，并按规定做好咨询、保密和报告工作。

　　（二）病毒载量测定

　　病毒载量一般用血浆中每毫升HIV RNA的拷贝数（c/ml）来表示。

　　病毒载量测定常用方法有逆转录PCR系统（RT-PCR）、核酸序列依赖性扩增(NASBA NucliSens )技术、分枝DNA信号放大系统（bDNA）。不同病毒载量试验方法的比较见表1。

　　表1　不同病毒载量试验方法的比较

技术原理	RT-PCR	bDNA	NASBA
动态范围	标准：（1.5版） 400-750 000c/ml 超敏：（1.5版） 50-75 000c/ml	bDNA3.0版： 50-500 000c/ml	Nuclisens HIV-1 QT： 176-3 500 000c/ml 取决于标本量
扩增的亚型	1.0版：只有B亚型 1.5版：B-G	A- H	A-G
样品量	Amplicor-0.2ml 超敏-0.5ml	1ml	10μl-2ml
抗凝剂	EDTA	EDTA	EDTA或肝素
标本	血浆	血浆、PBMC、精液、组织等	全血、血浆、PBMC、精液、组织等
检测样本要求	6小时之内分离血浆，运输前在-20℃或-70℃冷冻。	4小时之内分离血浆，运输前在-20℃或-70℃冷冻。	4小时之内分离血清或血浆，运输前在-20℃或-70℃冷冻

　　病毒载量测定的临床意义包括预测疾病进程、提供开始抗病毒治疗依据、评估治疗效果、指导治疗方案调整，也可作为HIV感染早期诊断的参考指标。

　　(三）　　CD4+　T淋巴细胞检测

　　CD4+ T淋巴细胞是HIV感染最主要的靶细胞，HIV感染人体后，出现CD4+ T淋巴细胞进行性减少，CD4+/CD8+ T细胞比值倒置现象，细胞免疫功能受损。如果进行HAART治疗，CD4+ T淋巴细胞在病程的不同阶段可有不同程度的增加。

常用的CD4+ T淋巴细胞亚群检测方法为流式细胞术，可以直接获得CD4+ T淋巴细胞数绝对值，或通过白细胞分类计数后换算为CD4+ T淋巴细胞绝对数。如无条件用流式细胞仪测定CD4+ T淋巴细胞者，可用淋巴细胞绝对数作为参考。CD4+ T淋巴细胞计数的临床意义是：了解机体的免疫状态和病程进展、确定疾病分期和治疗时机、判断治疗效果和HIV感染者的临床合并症。

　　CD4+ T淋巴细胞计数的检测间隔时间需根据病人的具体情况由临床医生决定：一般建议对于CD4+ T淋巴细胞数> 350/mm3的HIV无症状感染者，每年应检测一次；对于CD4+ T淋巴细胞数200—350/mm3之间且尚未开始AVT的HIV/AIDS病人，应每半年检测一次；对于已接受ART的病人在治疗的第一年内应每三

月进行一次CD4+ T淋巴细胞数检测，治疗一年以上且病情稳定的病人可改为每半年检测一次。